肺靶向汉防己甲素缓释微囊释药性能的体内外相关性

摘要：目的　评价靶向汉防己甲素缓释制剂释药性能的体内、外相关性。方法　以体外释药百分数为体外指标，选择靶部位的药效学指标作为反应体内释药的效能指标，进行相关性拟合和统计分析。结果体内外指标呈显著正相关性(P<0.001)。结论以选择的体内指标进行相关性分析是可行的，体外释药性能提示体内靶部位的微囊的缓释特性。
关键词：汉防己甲素；肺靶向；缓释性能；体内外相关性
一般的缓释、控释制剂可通过对体内、外有关参数的相关性考察，建立和确证体外释放试验和体内生物利用度试验之间相关关系。其主要目的是使体外释放试验结果作为人体生物利用度和生物等效性试验替代性的指示试验。一旦建立此关系，就可采用体外试验代替体内试验，即可用体外释放试验结果作为制剂的体内释药特性的指标。这种相关性考察，主要是基于药物在血浆或血清中的浓度。
靶向给药系统靶向性的指标主要是药物在靶部位的浓度通常靶部位所测定目标药物的浓度包括：释放出的游离药物和尚存在于载体中的药物（萃取后同时测定）两部分，故体内所测定的药物浓度不能恰当地说明药物的体内吸收过程。为此，反应药理疚的量化指标可较合理地代表药物的体内命运和最终目的，以这一指标与体外的参数建立相关关系，能更合理地评价靶向缓释给药系统的体内、外释药的相关性。
本实验将喷雾干燥-热变性法制得的肺靶向汉防已甲素缓释微囊进行体外释药试验，并进行对大鼠的降肺动脉高压药效学研究,以对大鼠的平均肺动脉压力(mean pulmonary arteral pressure,mPAP)改变为体内药效指标，将载药缓释微囊体外释药百分数与肺动脉高压模型大鼠的mPAP下降百分数建立相关关系，以考察其体内、外释药的相关性。
1　仪器、试药与动物
BECKMAN DU-640型紫外分光光度计（美国）；ZRS-4智能溶出试验仪（天津大学 无线电厂）；AE-200型电子天平（德国）；肺靶向汉防已甲素缓释微囊（Tetrandrine microcapsule TET-MC,自制）；Wistsr大鼠（华西医科大学实验动物中心）。
2　方法与结果
2．1　肺靶向汉防已甲素缓释微囊的相关性质
采用喷雾干燥-热变性微囊化工艺制备了肺靶向TET-MC，微囊外观呈圆球型，粉未微囊的粒径在2～10μm之间，在生理盐水中可均匀分散。微囊的生理盐水混悬液于37℃的恒温水浴放置2h后（模拟体内环境），微囊平均粒径为7.42μm，跨距 （span）为0.3176，微囊的载药量为37.88%（n=3）。
2．2　体外释药百分数
模拟药效学研究条件，对制得的TET-MC的混悬液进行体外释放试验，将微囊混悬液置液置入处理过的透析袋内，两端扎紧，置入转篮中，以0.1mol・L-1HCL900mL为释放介质，在（37±0.5）℃，50r・min-1条件下进行体外释药试验。分别于1，5，10，20，30，60min时取样3mL，同时补加等体积、同温度的释放介质。以二阶导数紫外分光光度法测定介质中TET的浓度，并计算累积释药百分数，计算不同时间段TET的释放百分数，结果见表1。
2.3　平均肺动脉压力的下降百分数
将低氧处理3周的肺动脉高压病理模型大鼠10只，经肺动脉插管测定mPAP，经左侧颈外静脉插管注入微囊的生理盐水混悬液（以TET计，给药剂量3.8mg・kg-1）,观察并记录用药前后平均肺动脉压力(mPAP)的变化.考虑到时间效应,根据某一时间点测定的mPAPi和给药前病理模型大鼠的平均肺动脉压力(mPAPo),以下式计算该时间点时平均肺动脉压力的下降百分数(ΔmPAP%),结果见表1。
2．4　相关性分析
将TET-MC于1，5，10，20，30，60min时TET的体外释药百分数对平均肺动脉压力下降百分数进行相关性分析，结果表明相关性好（相关系数r为0.9707）。
2．5　相关系数的t检验和体内、外相关性判定
计算t检验的统计量t值（9.031），查t界值表得P值（P<0.001）,结果表明：体外释药百分数与体内平均肺动脉压力下降百分数之间呈明显的正相关性（P<0.001）。
3　讨论
TET是从防已科植物粉防已中提取的生物碱，具有广泛的药理活性，实验研究及临床观察表明：TET有明显的抗高血压作用，不仅具有扩血管作用，而且抑制胶原增生和肺动脉平滑肌细胞的增生，直接作用于肺动脉血管，发挥降低肺动脉高压的作用。其肺靶向缓释微囊给药系统可将药物靶向性的递送至肺部毛细血管床，随着微囊的降解，TET不断从微囊释放，释放出的药物经肺部血流迅速到达肺动脉血管，为此选择不同时间段的释药百分数进行相关性分析，选择ΔmPAP%这一体内指标，是考虑到药物对肺动脉压力降低的药效特点。以上研究结果表明了TET-MC体外释药速率与其体内药效产生的相关性，可说明这一相产性研究方法基本合理。
靶向缓释给药系统在保证靶向性给药时，应考虑其缓释性能，以上的相关关系的建立是很有必要的。对于靶向性和缓释性两方面的体内、外相关考察，尚需引入合理的数学模型，结合室模型等参数进行较合量的研究，这具有挑战性和开拓性，值得深入探讨。