地黄含量测定方法（梓醇）

地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根。2005版《中国药典》收载的含量测定方法为高效液相色谱法，以梓醇为指标成分。现介绍梓醇的含量测定方法。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》地黄含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（1：99）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按梓醇峰计算不低于5000。
供试品溶液的制备：取本品（生地黄）切成约5mm的小块，经80℃减压干燥24小时后，磨成粗粉约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流提取1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣用流动相溶解，转移至10ml量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的HPLC法，一般使用药典方法，也有以不同浓度的乙腈溶液、甲醇-乙腈等为流动相的。检测波长一般为210nm。现具体举几例。
汪程远等测定地黄及其制品中梓醇的含量。采用LC-6A液相色谱仪，SPD-6A型紫外检测器(日本岛津)；以Inenrtsil ODS-2为固定相，水-乙腈(99.5：0.5)为流动相，检测波长210nm。梓醇的进样量在0.484～4.84μg时与峰面积呈良好的线性关系(Y=7.491×104X-3535×lO2，r=0.9999)，平均回收率99.0％，方法精密度RSD=1.3％(n=6)。样品处理：地黄样品切成2mm小块，分别加水40mL，振摇浸泡3h后，超声提取20min，过滤，药渣再分别用水超声提取两次，滤液过滤后合并，定容。
朱坤福测定地黄颗粒剂中梓醇的含量时，地黄颗粒剂用甲醇35min超声提取梓醇，经稀释后作为供试品溶液。采用YWG-C1 8反相柱(4.6mm×250mm，5μm)。水-乙腈(100：2)为流动相，检测波长210nm。梓醇在0.20～1.00μg范围内，线性关系良好，回归方程：Y=11236.6+3174626X，r=0.9996，加样平均回收率为98.43%，RSD=1.81%。

二、薄层扫描法
采用薄层扫描法测定梓醇含量时，常用的展开剂为氯仿-甲醇-水系统，检测波长为413nm。如：刘长河等测定不同产地地黄中梓醇含量。采用薄层扫描法，展开剂为氯仿-甲醇-水(7：4：0.5)，显色剂为10％硫酸乙醇溶液，扫描波长为413nm。回归方程为y=621.76X+118.69，r=0.9966，平均回收率为99.10％，RSD=2.50％ 。样品先用水提取，再用水饱和的正丁醇提取。

三、毛细管电泳法
赵新峰等测定生地、熟地及不同炮制时间地黄中梓醇的含量。采用毛细管区带电泳内标法定量。用未涂层石英玻璃毛细管(60cm×75μm，有效长度45cm)，检测波长210nm，重力进样(10cm ×5s)，运行电压14 kV，温度20℃，背景电解质为50 mmol-L 硼砂溶液。进样前以0.5 mol/L氢氧化钠溶液和背景电解质各冲洗3min。平均回收率生地为98.2％，熟地为99.5％；RSD分别为2.1％和2.4％ (n=5)。样品采用乙醇回流提取。