黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.var.mongholicus (Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根。2005版《中国药典》收载的含量测定方法为高效液相色谱法，以黄芪甲苷为对照。有关黄芪及其制剂的含量测定文献报道地比较多，主要有高效液相色谱法和薄层扫描法。
一、高效液相色谱法
⑴2005《中国药典》黄芪含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（32：68）为流动相，蒸发光散射检测器。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。
供试品溶液的制备：取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml。微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，长12cm），以水50ml洗脱，继用70%乙醇80ml洗脱，弃去洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
⑵文献报道
①高效液相色谱-紫外检测器
伍毅等测定复聪香液中黄芪甲苷的含量。采用岛津LC-10AD高效液相色谱仪，LC-10A溶剂输送泵，SPD-10Avp紫外检测器，Shim-pack VP-ODS色谱柱，(4.6mm×250mm，4.6μm)，流动相甲醇-乙腈-水(5：35：60)，流速1.0mL/min，柱温25℃，检测波长205nm。供试品溶液的制备：精密吸取样品10mL，加***于分液漏斗中萃取2次，每次10mL，弃去***液，水层用水饱和的正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇萃取液，用氨试液洗2次，每次20 mL，弃去氨液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至1OmL量瓶中，摇匀，以0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作供试品溶液。
金华等测定双黄连滴丸中黄芩苷的含量。采用日本Shimadzu-10A 高效液相色谱仪；色谱柱为CLC-ODS (250mm×4.6mm，10μm)，流动相为甲醇-冰醋酸-水(48：1：52)，检测波长为276nm，流速为1mL／min，柱温为25℃。理论塔板数按黄芩苷峰计应大于4500。
王秀莲等采用反相高效液相色谱法，测定助长1号片中黄芪甲苷的含量，用美国惠普1100高效液相色谱仪； Zorbbaxsb-C18(4．6mm×15cm，5μm)色谱柱，以乙腈：水为梯度洗脱流动相，检测波长为203nm，流速为1.0ml／min。
样品提取溶剂一般为甲醇、水饱和的正丁醇等，方法可采用超声波提取、索氏提取器提取、浸泡提取等不同方法，但一般都要经过氨液处理。由于黄芪甲苷仅在200nm处附近有弱的末端吸收，因此采用高效液相色谱-紫外检测器来测定含量时，操作条件须十分严格，噪音对结果影响也很大。所以采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法更为先进。
②高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD法)。
采用HPLC-ELSD法对黄芪甲苷进行含量测定，分离度好，重现性好，不需要进行前处理直接进样，回收率高。但检测灵敏度和精确度不如光二极管陈列法。常用的流动相为乙腈-水和甲醇-水系统。
张雪梅等测定了黄芪中黄芪甲苷的含量。高效液相色谱仪：Waters-600；积分仪：Shimadzu C-RTA；蒸发光散射检测器：SEDEX 55。色谱柱：美国Phenomenex公司Luna C18色谱柱(5μm，150mm×4.6mm)；流动相：甲醇-水(75：25)；流速：1.0 ml／min；进样量：10μl；ELSD参数：漂移管温度40℃；N2压力：2BAR。供试品溶液制备方法同下。
杨庆胜等建立了补益蒺藜片中黄芪甲苷的含量测定方法。采用高效液相色谱仪(美国Agilent 1100型，Agilent化学工作站提供)；ODS-C18色谱柱(250mm×4.6mm，20μm，大连依利特)；AlltechS00型蒸发光散射检测器；HGA-2000空气发生器。流动相为乙腈-水(1：2)；室温；流速1.0 mL／min；ELSD参数：漂移管温度100℃，气体流速2.74mL／min。供试品溶液制备：取补益蒺藜片适量，去除薄膜衣，研碎，取细粉约2.0g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇100mL，热回流提取6 h，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水15mL微热溶解，加***振摇提取2次，每次20mL，弃去醚层，再用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用氨试液提取2次，每次20mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5mL，使溶解，放冷，通过D101大孔树脂柱(1.5cm×12cm)，以水50mL洗脱，弃去水液，再以70％乙醇100mL洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干，用甲醇溶解，并定容至2mL量瓶中，经0．45μm微孔滤膜过滤后，作为供试品溶液。
张毅等测定了芪蛭降糖片中黄芪甲苷的含量。仪器：HP 1100高效液相色谱仪；Alltech 2000 ELSD检测器；Lichrospher 5 C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈-水-四氢呋喃(33：67：4)；流速：1.0mL／min；柱温：35℃。ELSD检测器参数：漂移管温度为ll0℃，N2流速为2.84mL／min。供试品溶液制备：取本品20片，除去薄膜衣，研细，过80目筛，精密称取2g，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声(500W，50kHz)处理40min，放冷，加甲醇补足重量，滤过，精密取续滤液25mL。回收甲醇并浓缩至干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次。每次20mL，弃去氨液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
二、薄层扫描法
200版《中国药典》收载的方法为薄层扫描法，文献报道的方法一般按照药典所载的方法。现具体举几例。
吕佳等用薄层扫描法对补气养血颗粒中黄芪的有效成分黄芪甲苷的含量进行测定。采用CS-930型薄层扫描仪(日本岛律)；硅胶G薄层板；以氯仿-甲醇-水(13：8：2)10℃ 以下放置过夜的下层溶液为展开剂；10％硫酸乙醇溶液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。双波长扫描，λS=530nm，λR=700nm。供试品溶液制备：本品研细，精密称取15g，加甲醇100mL，以索氏提取器加热回流提取3h，放冷，滤过，以少量甲醇洗涤容器和滤器，洗液并入滤液中。滤液回收甲醇至干，残渣加蒸馏水10mL，微热溶解，置分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20mL。合并正丁醇液，正丁醇液用氨试液洗涤2次(每次20mL)，弃去氨液。正丁醇液水浴蒸干，残渣用水5mL微热使溶解，放冷，通过Dl01型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)。以水50mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30mL 洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，加甲醇适量使溶解并转移至2mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
胡润淮等测定复方仙灵脾注射液中黄芪甲苷的含量。采用CS-9301型双波长薄层扫描仪(岛津)；展开剂：氯仿-甲醇-水(13：7：2)下层液。展开方式为上行，展距为10cm(展开前先饱和30min)。展开后取出薄层板，晾干，以10％硫酸乙醇溶液为显色剂进行显色，于105℃烘至斑点清晰。紫外365nm定位。反射法单波长锯齿扫描法，狭缝为1.2mm×1.2mm，线性参数SX=3，扫描宽度为14mm，灵敏度为中等，扫描波长为λS=500nm，λR=700nm。供试品溶液的制备：用移液管精密吸取复方仙灵脾注射液5ml，置分液漏斗中，先用0.1mol/L NaOH饱和过的正丁醇萃取3次(10，15，20 ml)，将正丁醇层用正丁醇饱和过的0.1mol/L NaOH溶液洗涤3次(15，20，20ml)，弃去碱液，正丁醇层置水浴上蒸干，残渣以水7ml溶解，置于已处理好的大孔吸附树脂柱，依次用蒸馏水、40％乙醇、50％乙醇适量进行洗脱。收集50％乙醇洗脱液，蒸干，用少量甲醇溶解，移至5ml量瓶中，用甲醇定容至刻度。
詹秀玲采用双波长薄层扫描法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。采用岛津CS-9301PC型双波长薄层扫描仪(日本)；0.2％羧甲基纤维素钠制备的硅胶G薄层板；展开剂为正丁醇-醋酸乙酯-水(4：1：5)的上层溶液-正丁醇-甲醇(10：2：1)，展开，取出，热风吹干；展距约15cm；10％硫酸乙醇溶液显色；双波长反射式锯齿扫描，测定波长：λS=520nm，λR=650nm；线性化参数SX=3；光束狭缝：0.4mm×0.4mm。供试品溶液的制备：取样品，混匀，精密量取25ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次(25，25，25，25，20m1)，合并正丁醇液，用氨试液提取3次，每次40ml，弃去氨试液，继用正丁醇饱和的水4Oral提取，取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
翟旭峰等对黄芪配方颗粒中的黄芪甲苷进行含量测定。采用瑞士CAMAG Scannerll薄层扫描仪；硅胶G薄层板，以正丁醇-醋酸乙酯-稀氨水(1→10)(4：1：5)的上层溶液为展开剂，另槽加等量的浓氨试液，预饱和15min，上行展开12cm，取出，喷以1O％硫酸乙醇溶液，105℃烘5～7min。至斑点显色清晰。取出。Hg灯，吸收波长530nm，反射式锯齿扫描测定。供试品溶液的制备：取本品粉末约3g，精密称定，置锥形瓶中，加少许水润湿，再加水饱和的正丁醇40mL，超声提取1h，滤过，滤液置于分液漏斗中，残渣用适量水饱的正丁醇洗涤3次，洗液并入滤液中，加3倍量浓氨试液振摇提取2次，放置分层，弃去氨试液，取上层液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。
应用最多的展开系统为氯仿-甲醇-水，另外常用的展开剂、显色剂及扫描波长为：硅胶H板，以乙酸乙酯-甲酸-氯仿-水(5：1：0.5：1) 为展开剂、λS =515nm，λR=675nm、5％硫酸乙醇溶液显色；硅胶G-0.1CMC-Na薄层板、 以-甲醇-正丁醇(10：1：2)，氨蒸气饱和、1O%硫酸乙醇溶液显色、λS=530nm，λR=700nm等。
采用此方法测定黄芪甲苷含量稳定，重现性好。但层析时要严格控制室温和空气湿度，一般室温不宜高于25℃，湿度也不宜过大，层析过程中常会出现拖尾现象，使分离效果不佳。
并且层析条件对层析结果影响也很大。如：展开温度；展开系统的饱和性；背景干扰因素等。因此要优选层析条件，使结果有较好的重现性。
三、分光光度法
此法主要是利用黄芪甲苷与显色剂发生显色反应。常用显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-冰醋酸等香草醛试剂(4％～10％)。在以往实验中应用较广泛，因为该法简便、快速，测定的灵敏度和选择性较高。但也有很多弊端，如：样品的前处理复杂，要求较高，必须经提取分离纯化等处理(因为此方法不能自行分离)以排除对测定黄芪甲甙的干扰。中药黄芪及其制剂中成分复杂，影响了分离提纯。同时，显色反应的影响因素较多，影响了该法的准确性和稳定性。随着分析技术的发展，该法已经几乎不用于黄芪甲甙的含量测定，这里就不作介绍了。
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