荜茇含量测定方法（胡椒碱）

荜茇为胡椒科植物荜茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果实。2005《中国药典》一部以胡椒碱为指标，二甲氨基苯甲醛为内标，采用高效液相色谱法测定含量。文献报道的方法基本上为高效液相色谱法。
一、高效液相色谱法
2005《中国药典》荜茇含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（77：23）为流动相，检测波长为343nm。理论板数按胡椒碱峰计算应不低于1500。

供试品溶液的制备：取本品中粉约0.25克，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加无水乙醇约80ml，超声处理（功率250W，频率20kHz）至少30分钟，放置至室温后，加无水乙醇至刻度，药匀，滤过，取续滤液加内标溶液，摇匀，即得。
文献报道的HPLC方法，采用的色谱条件基本上为药典方法，现将实验条件总结如下：

实验仪器中较常用的HPLC仪为：

①FRANK-2000P 型高效液相色谱仪(配有色谱工作站)，Kromasil C18色谱柱(4.6mm×200mm, 5μm) 大连依利特公司；

②Waters高效液相色谱仪，Nova-Pak C18柱(3.9×150mm,10μm)色谱柱；
供试品溶液的制备方法，常见的为采用超临界CO2萃取法提取，也有有以无水乙醇、氯仿-浓氨试液等为提取溶剂，采用超声法提取。

另外，韩文彬等采用一阶导数差示脉冲极谱法测定荜茇中胡椒碱的含量时，采用DP-A型微分脉冲极谱仪，实验中将仪器功能置FDDPP处, 选用滴汞电极为工作电极, 滴汞间隔为16s；银-氯化银电极为参比电极, 内装110mol/LKCl参比溶液；微铂电极为辅助电极, 以稳定电极电压, 使参比电极不受影响, 预置电压为-0.160V, 扫描范围为-0.16～-1.26V；电流灵敏度为5μA/V；扫描速度为100mV/s；脉冲振幅为40mV。荜茇药材取中粉，无水乙醇超声处理后加入少许盐酸。本方法是在差示脉冲极谱法基础上建立起来的一种新技术, 其特点是提高了方法的分辨率、分析速度和灵敏度, 基本上消除了空气中氧的干扰, 不需事先通氮脱氧，用于荜茇中胡椒碱的测试分析,简便、经济、灵敏、快速，可做为胡椒碱的定性参考。

二、薄层扫描法

阿古拉等用双波长薄层扫描法，对六味木香散中有效成分胡椒碱进行含量测定。采用岛津CS-9301 型双波长薄层扫描仪(日本)。薄层展开条件：硅胶G板，展开剂为苯-醋酸乙酯-无水甲醇(8：2：0.5)。扫描条件：扫描方式为反射法锯齿扫描,Sx=3 ,狭缝0.4×0.4mm，测定波长λs=335nm,参比波长λR=215nm。六味木香散以氯仿-氨水溶液为溶剂，浸渍提取。