高效液相色谱法测定心可宁胶囊中丹参酮ⅡA含量

ainuo 网络 2015-12-24 12:08:00
心可宁胶囊由丹参、三七、冰片等八味药材加工而成,收载于中华人民共和国卫生部药品标准中成方制剂第九册。功能活血散瘀,开窍止痛。用于冠心病、心绞痛、胸痛、心悸、眩晕。部颁标准以性状、鉴别和胶囊剂通则有关规定检定其质量,没有定量测定方法。按中医组方理论,丹参在心可宁胶囊中为君药,具有改善心肌缺血,抑制血栓形成等药理作用。丹参酮ⅡA是丹参中重要有效成分,丹参酮ⅡA的含量测定方法已有报道 ,心可宁胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定方法未见报道。本实验建立了高效液相色谱测定心可宁胶囊中丹参酮ⅡA含量的方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器:日本岛津公司LC―6A液相色谱泵,SIL-6B自动进样器,SPD-6AV紫外可见分光光度检测器,C-R 6A色谱数据处理器。
1.2 试药:丹参酮ⅡA对照品购自中国药品生物制品检定所。实验用生药饮片由本院中药房提供,经药检室检定符合中国药典规定。心可宁胶囊根据部颁标推自制。甲醇为色谱纯。对照品储备液为105.6μg/ml丹参酮ⅡA
甲醇溶液。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:LUNAC18分析色谱柱(4.6mmID X250mm,粒径5μm,柱温35℃,流动相为甲醇-水(85:15),流速0.7ml/min;检测波长270nm。在此色谱条件下,测得丹参酮ⅡA对照品,心可宁胶囊丹参阴性样品和心可宁胶囊样品色谱图。在图中,丹参酮ⅡA与其相邻峰的分离度为3.4,理论板数为19459。
值X(n=3)对进样浓度Y(μg/m1)线性回归,得回归方程Y=0.3028+0.002921X,r=0.9996,线性范围2.64―52.8 μg/ml。将对照品稀释后进样,以基线噪音3倍计算,最低检出浓度为0.05μg/ml。
2.3 仪器精密度和方法重复性:同一样品溶液重复进样5次,记录色谱峰面积,求得RSD为0.54%。同一批心可宁胶囊重复取样测定5次,记录色谱峰面积,求得RSD为1.60%。
2.4 加样回收率:按样品测定项下方法,精密称取心可宁胶囊6份,其中5份分别加入丹参酮IIA对照品,另外1份作空白。各份均以样品测定项下方法测定含量,求得平均回收率为104.1%,RSD为0.42%。
2.5 样品测定:取心可宁胶囊20粒,除去囊壳。取内容物混匀,精密称取适量(约相当丹参10g),置100mL磨口三角瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量。超声提取20min,放冷至室温,再称定重量,补足损失的甲醇,摇匀。取少量用微孔滤膜(0.45pan)滤过,弃取初滤液,取续滤液10μl注入液相色谱仪,记录丹参酮ⅡA色谱峰面积,外标法计算含量。测定了3批样品,丹参酮ⅡA含量分别是0.10、0.075和0.074/粒。
3 讨论
经稳定性实验,样品液在实验温度(22℃)下置棕色量瓶中,丹参酮ⅡA至少在48h内稳定。
本法操作简便、测定结果准确可靠,可用于心可宁胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定。
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