毛细管区带电泳法分离测定当归中阿魏酸的含量

　　高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE)是近十年来迅速发展的一种新型分离分析技术，具有高教、快速、低耗、样品用量小等特点。毛细管区带电泳法(capillary zone electr0phoresls，CZE)是HPCE的一种分离模式。它是根据带电组分在外加电场下电泳淌度的差异而进行分离的，在中药分析中得到了较为广泛的应用。当归是临床最为常用的中药之一。阿魏酸是其中抑制血小板凝集的主要有效成分，故多采用薄层扫描法和高效液相法测定其含量，作为评价当归及其制剂质量的指标之一。我们采用CZE法测定当归中阿魏酸的含量，取得满意的结果。
1 材料和方法
l_l 仪器和试剂 Waters Capillary Ion Analyzer．空心熔融石英毛细管75μm×100cm。阿魏酸和双氯芬酸标准对照品由中国药品生物制品橙定所提供。当归为市售品。硼砂、己醇均为分析纯。
1．2 电泳条件缓冲液为20mmol／L硼砂溶液，运行电压25kV，温度25℃，虹吸进样，时间为10s，柱上紫外检测，波长214nm。
1．3 样品测定 精密称定当归细粉适量，置于25ml容量瓶中，加入70%乙醇适量，超声振荡提取45min。加入内标双氯芬酸使其浓度为40μg／ml定容，离心后取上清液进样测定。
1．4 加样回收率实验精密称定当归细粉适量，置于25ml容量瓶中。加入阿魏酸对照品适量，按样品测定项下的步骤进行操作并计算回收率。
2 结果和讨论
2．1 电泳每件的选择 阿魏酸的最大吸收波长约在313nm，但由于仪器条件所限t故本实验采用214nm进行检测，仍取得良好效果。本实验采用稿砂缓冲液进行分离，通过考察稿砂浓度对丹离的影响，确定20mmol／L 硼砂液为丹离用缓冲液，在此条件下，当归中的其他组分与阿魏酸和所选内标产生良好的分离。
2．2 标准曲线精取阿魏酸对照品10，2O，40，60，80μg于1ml容量瓶中，分别加入内标40μg，用70%乙醇定容。接前述电泳条件进行分离测定，记录阿魏酸和内标的峰面积之比Yn在此浓度范围内Y与浓度X的回归方程为：Y =30.12X 一0.020 76(r=0.9992)。
2.3 精密度 按高、中、低3种浓度对阿魏酸进行日内和日间精密度实验，结果表明，测定方法的重理性良好。
2．4 加样回收率 阿魏酸的加样回收率为97.25%，RSD为1.94%(n=5)。
2．5 样品制定采用所建立的方法对3批市售当归各测定5次，测定结果表明，当归中阿魏酸的含量差异较大，
这与当归的产地不同或采收季节不同均可产生较大差异有关，也说明对生药当归质量控制的必要性。
3 结论
本研究建立了具有良好线性关系和重现性的CZE法分离测定常用中药当归中的阿魏酸，方法准确、简便，为当归的质量控制提供了新的方法学手段，可以预见，CZE法的特点将使其在中药分析中有着极为诱人的发展前景。