胡芦巴本品为豆科植物葫芦巴Trigonella foenum-graecum L.的干燥成熟种子。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法,以胡芦巴碱为指标,测定其含量。
2005版《中国药典》胡芦巴含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.05%十二烷基磺酸钠溶液-冰醋酸(20:80:0.1)为流动相,检测波长为265nm;理论板数按胡芦巴碱峰计算应不低于4000。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,精密加入50%甲醇50ml,密塞,称定重量,放置1小时,超声处理(功率300W,频率50kHz)45分钟,放冷,密塞,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
文献报道的方法一般为高效液相色谱法,流动相系统为乙腈-水,如:赵怀清等测定不同产地胡芦巴中胡芦巴碱的含量时,采用L- 7110型高效液相色谱仪(日本日立公司),L-7400型紫外检测器(日本日立公司),江申色谱工作站。色谱柱为 Asahipak NH-P -50( 4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(75:25);流速0.8mL/min;检测波长265 nm;柱温室温。制备供试品溶液时,以石油醚(60~90 ℃)为溶剂,索氏提取,弃去石油醚,药渣再用乙醇回流提取。作者在测定胡芦巴中胡芦巴碱的含量时也采用此方法。
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