紫菀为菊科植物紫菀Aster tataricus L.f.的干燥根及茎。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定紫菀酮的含量,有关紫菀及其制剂紫菀酮的含量测定方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法等。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》紫菀含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(96:4)为流动相;检测波长为200nm。柱温40℃。理论板数按紫菀酮峰计算应不得低于3500。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇20ml,称定重量,40℃温浸1小时,超声处理(功率250W,频率40kHz)15分钟,取出,冷却至室温,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,即得。
紫菀酮没有紫外吸收,文献报道HPLC法测定紫菀酮含量时常采用末端吸收。如:张军等采用HPLC法测定紫菀止嗽颗粒中紫菀酮的含量。DIONEX SUMMIT高效液相色谱仪,phenomenex C18柱(250×4.6mm);乙腈为流动相;流速1ml/min;检测波长203nm;柱温30℃。紫菀酮在0.020~0.100μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9996;平均加样回收率为97.8%,RSD=2.67%(n=5)。样品用氯仿温浸后超声处理。王国艳等测定紫菀中紫菀酮的含量时,采用相同的实验方法。
也有使用蒸发光散射检测器的,如:李萍等测定紫菀止咳冲剂中紫菀酮的含量时,采用日本LC-6A高效液相色谱泵,美国Alltech ELSD 500检测器。色谱条件为:Phenomenex luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(95:5);ELSD为检测器;流速1.0ml/min;气化室温度:76℃;气体流量1.9L/min。样品用氯仿温浸后超声处理,再经硅胶小柱处理(用氯仿洗脱)。张彬等测定紫菀中紫菀酮的含量时也采用相同的实验方法,流动相为乙腈-水(98:2)
二、薄层扫描法
秦文杰等薄层扫描法测定蝉蜕止咳颗粒中紫菀酮的含量。薄层色谱条件:硅胶G板;展开剂:石油醚(60~90℃)-醋酸乙酯(19:1)。显色剂:10%硫酸乙醇。扫描波长为490nm。紫菀酮线性范围为0.96~5.76μg,r=0.9998,平均回收率为98.67%,RSD=0.77%。样品用氯仿超声处理。张旭等测定止咳清肺口服液中紫菀酮的含量时,采用相同的薄层条件,扫描条件为双波长反射法锯齿扫描,Λs=390nm,λR=650nm。
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