菊花为菊科植物菊Vhrysanthemum morifolium Ramat.的干燥头状花序。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其绿原酸的含量。绿原酸的含量测定方法报道得较多，现介绍菊花及其制剂中绿原酸的测定方法。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》菊花含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液-甲醇（70：30）为流动相；检测波长为328nm。理论板数按绿原酸峰计算应不得低于2500。
供试品溶液的制备：取本品粉末（过一号筛）约1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，加热回流2小时，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密；精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加三氯甲烷5ml，浸渍3分钟，弃去三氯甲烷液，残渣挥去三氯甲烷，加水适量使溶解，并转移至5ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
文献报道的HPLC法一般为药典条件，如：①LC-6AD 型高效液相色谱仪(日本岛津公司)色谱柱为D iamon silTMC18 (4.6mm×150mm, 5μm )；0.1mol/L磷酸二氢钠-甲醇(7.3：2.7) 为流动相；检测波长为326nm；柱温32℃。样品用丙酮超声处理。（杨振萍等，“HPLC测定川菊中绿原酸的含量”，光谱实验室，2005，22（5））。②PEIntegral 4000高效液相色谱仪；Nova-Pak C18色谱柱(4μm,4.6mm×250mm)；流动相的配制：取磷酸二氢钠适量制成0.1mol/L的溶液,按2ml/L的比例加入磷酸适量,调整pH为2.65,超滤后与甲醇按70：30的比例混合；检测波长为328nm；温为室温。（李宗等，“菊花中绿原酸的含量测定”，中国中药杂志，1999，24（6））等。
顾瑶华等分析不同药用菊花品种绿原酸的含量时，采用惠普HP-1100系列高效液相色谱仪；色谱柱Kromasil C18柱；流动相以甲醇-水-磷酸（30：70：0.4）等度洗脱；检测波长328nm；柱温为室温。
二、紫外分光光度法
陈勇敢等测定菊花速溶片中绿原酸的含量，采用UV 2265紫外分光光度计，在328nm处测定。结果表明用紫外分光光度法测定菊花速溶片中绿原酸的含量, 不需分离提取, 具有操作简便、分析快捷、结果重现性好、回收率高的特点, 特别适用于基层单位适用。
展开全文