茜草为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根及根茎。2005版《中国药典》一部收载的含量测定方法以大叶茜草素为指标,采用高效液相色谱法测定。文献报道的茜草中大叶茜草素的含量测定方法主要为高效液相色谱法。
2005版《中国药典》茜草含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-四氢呋喃(310:90:3)为流动相,检测波长为250nm。理论板数按大叶茜草素峰计算应不低于4000。
供试品溶液的制备:取本品粉末约0.2克,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇25 ml,称定重量,浸泡过夜,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
文献报道的方法中采用的流动相系统大多为甲醇-水-四氢呋喃系统,供试品溶液制备方法都按药典法操作。现将实验条件总结如下:
FRANK-2000型高效液相色谱仪;紫外-可变波长检测器;Hypersil(200×4.6mm,5μm);
FRANK- 2000P 型高效液相色谱仪(配有色谱工作站); Spherisob C18( 4.6mm×200mm ,5μm);
HP1100 高效液相色谱仪, 配有HP-DAD-G1315A紫外检测器;安捷伦Extend C18柱(250mm ×4.6mm, 5μm);
美国惠普HP1100、DAD 检测器;WIND-3D工作站;Kromasi C18 (5μ, 250×4.6mm , 天津特纳科学仪器有限公司)。
其它实验条件如:李敬伟等采用反相高效液相色谱法测定蒙药巴特日七味丸中大叶茜草素的含量时,采用FRANK- 2000P 型高效液相色谱仪。色谱柱为Spherisob C18( 4.6mm×200mm,5μm);流动相为甲醇-水-乙腈(6∶3∶1);检测波长:250nm。
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