放射免疫法测定鹿茸性激素的含量

ainuo 网络 2015-12-24 12:10:00

激素是具有高度生物活性的物质,在极低的浓度下就可起作用。其含量一般分析方法如紫外法、毛细管色谱法和高效液相色谱法难以测定。本文利用放射免疫法测定鹿茸中雌二醇和睾酮的含量,为鹿茸的有效成分和品质评价提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料:澳鹿茸购自同仁堂参茸公司,经鉴定为澳鹿Cervus
australicum的未骨化幼骨;梅花鹿茸由吉林敖东延边制药厂生产,经鉴定为梅花鹿C.nippon的未骨化幼骨;伪鹿茸购于河北安国药市,经鉴定为梅花鹿C.nippon已骨化角;鹿角胶为河南老君堂制药有限公司的产品;鹿角镑购于白塔寺药店,经鉴定为C.nippon梅花鹿的已骨化角。所有试剂均为分析纯。

雌二醇和睾酮的放射免疫盒由北京北方生物技术研究所提供,雌二醇抗体与雌三醇、睾酮和孕酮均无交叉反应,检测范围为10~100
pg/mL;睾酮抗体与雌二醇、雌三醇和胆固醇均无交叉反应,检测范围为0.5~20
ng/mL。

1.2 方法:将样品粉碎过80目筛,精密称取0.5 g,置50mL的烧瓶中,精密加入30mL甲醇,回流1
h,冷却。精密吸取上清液2 mL,吹干,测定时加含白蛋白的磷酸缓冲液复溶。所有数据以t检验进行显著性差异比较。
2 结果
澳鹿茸的雌二醇含量最高为(15.3±1.82)
ng/g,为鹿胶镑的8倍,其次梅花鹿茸含量为(11.4±1.26) ng/g,为鹿角镑的6倍,两者与鹿角镑相比有极显著性差别(P<0.01);伪鹿茸和鹿角胶雌二醇含量较低,与鹿角镑相比没有显著性差异(P>0.05);睾酮的含量低且差别不大,样品之间没有显著性差别。


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