离子交换法提取精氨酸

ainuo 网络 2015-12-24 12:10:00

摘要 利用提取肮氨酸后的母液.在pH2.5的条件下用732型阳离子树脂分离精氨酸,提取率为86%。
关键词 精氨酸;离子交换法;分离;胱氨酸母液;氨基酸
人发中古有多种氮基藏.其中精氮酸约占毛发重量的6.1%.提取胱氨酸后的母液中精氨酸损失甚少.因此
可将母液经除盐后.用强酸性阳离子交换树脂进行交换分离出精氨酸。
1 原理
氨基酸藏在pH值低于等电点时呈阳离子状态,高于等电点时呈阴离子状态。氨基酸对阳离子交换树脂的亲和力的太小与其等电点的高低密切相关。精氨酸为碱性氨基酸.其等电点时pH值为0.8.亲和力最强.因此通过控制树脂用量就可变换分离出精氨酸。
2 实验
2 1 试剂
732阳离子交换村脂.氨水(化学纯).盐酸(化学纯),活性炭(糖用)。
2.2 检测方法
茚兰酮反应:取少量检测液滴于滤纸上吹干,用0.1%茚三酮与无水丙酮混合液喷雾.显紫色。
坂口反应 :A液:0.1%8-羟基睦啉丙酮液.B液:1 mol溴溶于500mL的O.5mol/L氢氧化钠溶中.于凹形白瓷盘中,加待检样品一滴.加5%氢氧化钠溶液一滴,加A液及B液各一滴,显红色证明有精氨酸存在。
2.3 除盐
将提取胱氨酸后的母藏用lO %的盐酸调至pH2.4两次浓缩除盐,再稀释至相对密度1.2lO~1.228,待用。
2. 交换、洗脱和结晶
将上述液体以每分钟为树脂床体积的0.5%~0.6%的流速加至树脂床上(交换柱直径与柱高比为1:8或1:6),交换完毕.用击离子水由下至上洗涤村脂床.至流出液的pH值为5时停止。再用0.1mol/L氨水洗脱树脂柱.流速与上述相同。当流出藏pH升至11左右,出现一段空白区,即洗脱液与茚三酮无显色反应。此时改用2mol/L氨水洗脱,流速不变.用坂口反应检查冼脱,待有精氨酸出现时开始收集.直到坂口反应消失。将欲结晶的精氨酸减压浓缩到浓度为相对密度1.124左右.用10%盐酸调至pH4.5.加热至沸.立即加入精氨酸量的1%的活性炭.脱色0.5h.冷却后过滤去炭渣,将滤液浓缩至粘稠状.搅拌0.5h静置待析出结晶时加入1.5倍量的95%乙醇,再搅拌0.5h,静置2h。分离出结晶物,井于75℃烘干,提取率为86%。
3 结果与讨论
732型阳离子交换树脂对持氨酸的交换容量为0.16mmol/g。操作时.树脂用量要适当,多刚影响纯度.少则提取率降底,在交换和洗脱时流速不应太大,否则会发生穿漏;用本文相似的方法可将人发中其它十几种氨基酸逐个分离,这对于进一步综合利用毛发资源具有重要的作用。
参考文献
1 天津轻工学院等.氨基酸工艺学.北京;轻工业出版杜,1986.
2 李东光等48种实用化学产品制造技术.山东:金盾出版杜,1990

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