用大孔吸附树脂分离川芎总提物

1　大孔吸附树脂的预处理及再生

1.1　预处理：取市售大孔吸附树脂，用乙醇加热回流洗脱(或用改良索氏提取器加热洗脱)，洗至洗脱液蒸干后无残留物。经乙醇洗净的树脂挥去溶剂后保存备用。
1.2　装柱：以乙醇湿法装柱，继续用乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出的乙醇，至与水混合不呈白色混浊为止(取1 mL乙醇液加5 mL水)。然后以大量的蒸馏水洗去乙醇，备用。少量乙醇存在将会大大降低树脂的吸附力。
1.3　再生：将样品溶于少量水中加至柱的上端，也可以将样品先溶于少量乙醇中，拌入适量树脂，挥去乙醇后，再将拌有样品的树脂加到柱上。先用水，继而以乙醇-水洗脱，逐步加大醇的浓度，同时配合高效液相色谱法作指导。一般用95%的乙醇洗脱至无色时，树脂柱即已再生，然后以大量水洗去醇，即可进行下一次的提取分离。经反复使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用0.01%～1 mol/L NaOH(或HCl)洗涤或浸泡适当时间，至树脂接近原颜色为宜，继用蒸馏水洗至中性即可再用。如果柱上方沉积有悬浮物，影响流速，可用水从柱上进行反洗，以便把悬浮物顶出。经多次使用后，有时柱床挤压过紧，或树脂颗粒部分破碎而影响流速，可从柱中取出树脂，盛于一个较大容器中用水漂洗除去小颗粒和悬浮杂质，再重新装柱。大孔吸附树脂应湿态保存，若部分颗粒暴露在空气中失水，在进行水溶性杂质分离时，失水后被空气填充的颗粒会浮于水面，此时将上浮树脂用乙醇处理，将树脂内部的空气排出后使用。

2　川芎总提取物的分离

取川芎饮片，略破碎，用95%乙醇回流提取9次，每次1.5 h，溶媒用量为8～10倍，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至干，再加适量水加热使溶解，抽滤，滤液加到已处理好的大孔吸附树脂柱(干膏和树脂的比例为1∶15～20，或药材和树脂的比例为1∶2～3)上，慢慢滴加完后，先用水洗至还原糖反应呈阴性(Molish反应)，改用30%乙醇洗至阿魏酸和川芎嗪全部洗脱完全(Rp-HPLC法检测，检测液中无阿魏酸和川芎嗪的色谱峰)，合并30%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至干，低温真空干燥，呈淡黄色粉末，即为川芎总提取物(含川芎生物碱类和酚类化合物)，其中川芎嗪和阿魏酸二者约占本品的25%～29%，收率为0.6%。