“壮阳促孕散”补肾壮阳作用的研究

摘　要：采用小鼠肾阳虚证(去势)模型及少精模型，探讨了壮阳促孕散对雄性小鼠补肾壮阳的作用。结果表明，壮阳促孕散能明显提高去势小鼠包皮腺、精液囊-前列腺指数，大大缩短阴茎勃起潜伏期，并能显著提高少精模型小鼠的精子数量及精子活率，使低龄小鼠血清睾酮含量明显增加。提示壮阳促孕散具有补肾壮阳作用。

关键词：壮阳促孕散；小鼠；补肾壮阳

“壮阳促孕散”是根据中兽医基础理论结合动物生理特点而研制的纯中药复方制剂，由菟丝子、巴戟天等多味中药组成。具有调控动物生殖内分泌机能的作用，对雄性动物具有补肾壮阳的作用。延边大学农学院动物医学系实验室从1996年开始，针对圈养熊普遍存在繁殖机能障碍，用该中药制剂在中国延边白头山熊场和华龙集团养熊场利用繁殖障碍熊进行了繁殖试验，取得了显著的效果。为了进一步研究其补肾壮阳功能，我们进行了以下药理学研究，以期为兽医临床用药提供可靠的理论依据。

1　材料与方法

1.1　实验动物

昆明雄性小鼠，由延边医学院实验动物科提供。

1.2　药品

“壮阳促孕散”由延边大学农学院药理实验室研制。甲睾酮片由天津飞鹰制药有限公司生产，批号20060706，规格为每片5mg。睾酮放射免疫试剂盒由日本东京大学提供。五子衍宗丸，由承德天原药业有限公司生产，批号0600101，规格每丸9 g。

1.3　主要仪器

Olympus(C011)显微镜日本Olympus公司生产。低速台式离心机为上海安亭科学仪器厂生产。DCQ-3A型电刺激仪为蚌埠高灵传感技术应用研究所生产。

1.4　方法

1.4.1　“壮阳促孕散”对小鼠肾阳虚证的影响　取雄性小鼠，切除双侧睾丸，休息10 d，附性器官已充分萎缩。去势小鼠随机分为5组，每组5只，即模型对照组、阳性对照组(五子衍宗丸)、“壮阳促孕散”低(0.2 g/kg体重)、中(0.4g/kg体重)、高(0.6 g/kg体重)剂量组，及空白对照组(即未手术组)，连续给药14 d。末次给药后1h观察阴茎勃起潜伏期。次日处死动物，取副性腺称重，计算脏器系数。

1.4.2　“壮阳促孕散”对小鼠精液指标的影响　取30只雄性小鼠，随机分成6组，每组5只。空白对照组给予生理盐水，其余5组动物参照雷涛等的方法制造少精模型，造模结束后按0.2、0.4、0.6 g/kg体重灌胃给予壮阳促孕散及五子衍宗丸(阳性对照组)，连续30d。试验结束时处死小鼠，摘取一侧附睾尾，制成精子悬液，记录精子数及精子成活率。

1.4.3　“壮阳促孕散”对正常雄性低龄小鼠激素的影响　取健康雄性昆明小鼠30只，随机分为3组，每组10只，空白对照组给予等体积生理盐水，给药组(壮阳促孕散0.4g/kg体重)，阳性对照组(甲基睾丸素0.002 g/kg体重)。每天灌胃1次，连续给药21 d。最后一次给药30min眼眶取血，分离血清，将样本进行前处理，利用放射免疫试剂盒测定睾酮含量。

2　结果

2.1　“壮阳促孕散”对小鼠肾阳虚证的影响

包皮腺模型组与对空白照组比较差异极显著(P<0.01)，低、中剂量组及阳性组与模型组比较差异显著(P<0.05)，高剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01)；精液囊-前列腺模型组与空白对照组比较差异极显著(P<0.01)，低、中剂量组及阳性组与模型组比较差异显著(P<0.05)，高剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01)；阴茎勃起潜伏期模型组与空白对照组比较差异极显著(P<0.01)，壮阳散高剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01)，中、低剂量组与模型组比较差异显著(P<0.05)(表1)。结果表明该药对雄性去势小鼠包皮腺，精液囊-前列腺的脏器指数有明显的增重作用，并可使阴茎勃起潜伏期大大缩短。

表1　“壮阳促孕散”对雄性去势小鼠性器官的影响

Table 1　The effect of“ZCF”on the sexual organs in emasculative mice

注：①与空白对照组比较，“*”P<0.05，“**”P<0.01；②与模型组比较：“a”P<0.05，“aa”P<0.01。

Note：①Compared with control group，“*”P<0.05，“**”P<0.01；②Compared with model group，“a”P<0.05，“aa”P<0.01.

2.2　“壮阳促孕散”对小鼠精液的影响

精子数模型组与正常对照组比较差异极显著(P<0.01)，壮阳促孕散低剂量组与模型组比较差异显著(P<0.05)，中、高剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01)；精子活率，模型组与正常对照组比较差异极显著(P<0.01)(表2)；壮阳促孕散低、中、高剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01)。结果表明该药可提高精子数量，改善精子质量。

表2　“壮阳促孕散”对雄性小白鼠精液的影响

Table 2　The effect of“ZCF”on the sperm of mice

注：①与空白对照组比较：“*”P<0.05，“**”P<0.01；②与模型组比较：“a”P<0.05，“aa”P<0.01。

Note：①Compared with control group，“*”P<0.05，“**”P<0.01；②Compared with model group，“a”P<0.05，“aa”P<0.01.

2.3　“壮阳促孕散”对正常雄性低龄小鼠激素的影响

血清睾酮含量，给药组及阳性对照组与空白组比较差异极显著(P<0.01)(表3)。结果表明，该药可增加未成年雄性幼鼠血清睾酮含量。

表3　“壮阳促孕散”对未成年雄性小白鼠血清睾酮含量的影响(±SD)

Table 3　The effect of“ZCF”on the testosterone in young mice

注：与空白对照组比较：“*”P<0.05，“**”P<0.01。

Note：Compared with control group，“*”P<0.05，“**”P<0.01.

3　讨论

性腺和性器官的发育与成熟是维持雄性第二性征和性功能正常的重要因素。一旦性腺组织萎缩或重量减轻，那么由性腺等组织分泌并进入血液当中的性激素含量则显著减少，由此可导致动物性功能紊乱或衰退。有学者指出，性腺萎缩、性器官重量减轻等是老龄动物生理衰老与部分性功能障碍者病理改变的特征之一，认为逆转性腺萎缩、性器官重量减轻是治疗性功能障碍的有效措施。本试验采用手术阉割法摘除动物双侧睾丸(即去势，类似肾虚证)人为造成性腺缺如和附性器官萎缩，观察药物对去势动物附性器官的影响。结果表明，小鼠在去势后，其附性器官的重量指数明显比正常小鼠减少，出现组织萎缩，阴茎勃起潜伏期明显延长。经服用“壮阳促孕散”后，上述症状明显减轻，说明性腺的摘除和性激素的减少影响了动物的性功能，而本品具有性激素样作用。

祖国医学认为，肾为全身阳气之源，肾阳虚则五脏六腑生理功能减退，并伴有虚寒肌冷症状。文献认为肾阳虚的主要发病环节在下丘脑，引起下丘脑-垂体-肾上腺皮质-胸腺(HPAT)轴功能紊乱，补肾阳方可直接作用于下丘脑来提高HPAT轴功能。阳虚时能量代谢水平低下，甲状腺继发微循环障碍引起慢性缺氧。这些原因可能是阳虚证小鼠形寒肢冷，体重下降的原因。肾阳与生殖生理关系密切，肾阳虚表现为性欲减退、阳萎、不孕不育等症状。不良的环境因素，应激，房劳过度、久病体虚等因素都可造成动物内分泌系统功能紊乱，体内激素分泌失调或下降，久之导致下丘脑-垂体-性腺轴功能异常，最终引起性器官萎缩和性欲下降阳痿、早泄。延边大学农学院药理实验室也曾针对氢化可的松阳虚模型进行试验，结果“壮阳促孕散”能显著改善试验性阳虚证，提示该药具有补肾壮阳作用和雄激素样作用，它作用点是否也在下丘脑或HPAT，还有待研究。

“壮阳促孕散”严格遵守中兽医理论，科学组方。组方中菟丝子为助阳药，具有滋补肝肾，固精，安胎等功能。现代药理研究显示，菟丝子酮类成分对下丘脑-垂体-性腺轴内分泌功能具有多方位的影响，能显著提高人精子的运动速度和精子活动指数，能明显增加幼年小鼠睾丸和附睾的重量。本试验结果显示，“壮阳促孕散”具有提高精子数量，改善精子质量，增加未成年雄性幼鼠血清睾酮含量的作用。但其确切机理尚需进行深入及更全面的研究。