新城疫(ND)是禽类的一种高度接触性、烈性传染病,给许多国家的养禽业带来严重的经济损失。ND的病原为新城疫病毒(NDV),属副黏病毒科腮腺炎病毒属的成员,是一种具有囊膜的RNA病毒,严重地危害着养鸡业的发展。疫苗接种是防治该病的重要措施之一,但近年来,ND并未得到有效控制,其中一个因素可能是接种疫苗的有效抗原量不足。因此,本试验将对NDV浓缩抗原制成的油乳剂灭活疫苗接种雏鸡,就抗原接种量对鸡体液免疫应答的影响作一些探讨。
材料与方法
病毒 鸡ND La sota疫苗株和鸡ND F48E9强毒株均购自中国兽药监察所。
实验鸡 SPF种蛋购自济南斯法帕斯公司,由瑞普公司孵化车间孵化,饲养至7 日龄时用于试验。
血清 新城疫阳性血清购自中国兽药监察所。
鸡红细胞悬液采成年公鸡血,用20倍量PBS洗涤3次~4次,每次以2000r/分钟离心3分钟~4分钟,最后一次5分钟,用PBS配成1%(V/V)悬液。
油乳剂灭活疫苗的制备及免疫按常规方法制备NDV油乳剂单相灭活疫苗。试验分为4组,A、B、C组各20只鸡,颈背部皮下注射接种NDV油乳剂灭活疫苗,A、B组每只注射0.1毫升,C组每只注射0.2毫升,D组10只鸡作为阴性对照,不做免疫。具体试验情况如下:A组:接种NDV浓缩油乳剂灭活疫苗(灭活前LaSota病毒含量ND≥109.0EID50/0.1毫升,是国标的10倍);B组:接种3倍NDV浓缩油乳剂灭活疫苗(灭活前LaSota病毒含量ND≥108.7EID50/0.1毫升,是国标的5倍);C组:接种NDV常规油乳剂灭活疫苗(灭活前LaSota病毒含量ND≥108.0EID50/0.1毫升,为国家标准);D组:非免疫对照。
血清抗体测定 分别于免疫后1周、2周、3周、4周、5周、8周、10周、12周、14周采集鸡血样,常规方法测定ND抗体。
保护实验免疫28天后,各试验组选取10只免疫鸡,对照组全部10只肌肉注射鸡NDF48E9强毒株每只1毫升(含104ELD50),攻毒后观察14天,记录鸡只发病情况。
(未完待续)
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