阿米卡星脂质体对猪肺疫的疗效试验

摘　要：为研究阿米卡星脂质体的临床疗效，对110例被诊断为患猪肺疫(猪巴氏杆菌病)的仔猪进行了疗效试验。将患猪随机分为3组，空白对照组肌肉注射生理盐水；药物对照组肌肉注射阿米卡星，剂量为7.5mg/kg，每天用药2次，连用5 d；试验药物组肌注阿米卡星脂质体，剂量为5.0 mg/kg，每天用药1次，连用3d。结果表明，阿米卡星脂质体组治愈率和有效率分别为70.0%和76.0%，疗效显著高于药物对照组(P<0.01)。

关键词：阿米卡星脂质体；猪肺疫；疗效

猪巴氏杆菌病又称猪肺疫，是由多杀性巴氏杆菌引起的猪的一种以呼吸性症侯群为主的细菌性传染病，造成猪只增重缓慢、饲料利用率下降和死亡，往往造成很大的经济损失。该病一年四季都可能发生，尤其以冬春寒冷季节发病率高，且不同品种、年龄的猪均易感染。若防治措施不当，病死率很高，有时可达95%以上，给养猪业的发展带来严重的危害。长期以来，该病被认为是常发生和经济意义重大的猪病之一，临床治疗上多采用阿米卡星。阿米卡星因抗菌谱广，对革兰氏阴性菌有较好的治疗效果，特别是当细菌对其他氨基糖苷类抗生素耐药时，对阿米卡星往往仍敏感。但由于阿米卡星生物半衰期短，用量大，且具有耳、肾毒性，因而限制了它在临床上的广泛应用。阿米卡星的脂质体剂型具有良好的生物相容性和靶向性，能够延长有效血药浓度时间，降低毒副作用，提高疗效。为验证其对猪巴氏杆菌病的治疗效果，本试验将阿米卡星脂质体注射液和阿米卡星注射液做了药物对比治疗试验，现将试验结果报告如下。

1　材料与方法

1.1　材料

1.1.1　药物　阿米卡星脂质体注射液，与湖南五指峰药业联合制备，制备方法为逆向蒸发结合超声法，包封率65%，为含阿米卡星10mg/mL的乳白色悬浮液。

阿米卡星注射液，哈尔滨制药三厂生产，100 mg/mL。

1.1.2　治疗试验病猪的选择　试验选岳阳某猪场自然患病仔猪110例，品种相同，年龄，健康状态相近或相似。

1.1.3　诊断方法

1.1.3.1　临床症状

潜伏期一般为1 d～5 d。根据病的发展过程，可分为最急性、急性和慢性三个病型。

(1)最急性型　往往呈败血症症状，病猪体温突然上升到41 ℃～42℃，呼吸困难，心跳加快，不食，口鼻黏膜发紫。耳根、颈部、腹部等处发生出血性红斑。咽喉肿胀，坚硬。呼吸极度困难病猪呈犬坐势，在数小时到1d内死亡。

(2)急性型　往往呈现胸膜肺炎症状。体温上升至40 ℃～41℃左右。呼吸困难，有短而干的咳嗽，流鼻涕，气喘。有黏液性或脓性结膜炎。皮肤出现出血红紫斑。初便秘，后腹泻。往往在2 d～3d内死亡，存活者多转为慢性。

(3)慢性型　表现为持续咳嗽，呼吸困难。病猪逐渐消瘦，有时关节发生肿胀。最后持续腹泻，衰竭而死。

1.1.3.2　病理剖检变化

(1)最急性　咽喉黏膜有急性炎症，周围组织浆液浸润。淋巴结出血肿胀。肺急性水肿，肾及膀胱可能有出血点。除皮肤有出血斑外，黏膜有时也有小点出血。脾不肿大。

(2)急性型　主要为胸膜肺炎，肺有各期肺炎病变，有出血斑点、水肿、气肿和红色肝变区，或有纤维样粘附物，常与胸膜粘连。支气管淋巴结肿大，胃肠道有卡他性炎或出血性炎。

(3)慢性型　肺见多处坏死灶。胸膜及心包有纤维素絮状物附着。咽喉部水肿且有胶冻样淡黄色纤维性浆液。

1.1.3.3　实验室诊断

(1)无菌取死亡猪心血涂片，肝、脾、淋巴结组织触片，进行革兰氏染色和碱性美蓝染色，见到多量的革兰氏阴性、两极浓染、两端钝圆的短杆菌。

(2)无菌取肺、脾、淋巴结等病变组织，接种普通营养肉汤、厌氧肉汤、鲜血琼脂，37 ℃恒温培养24 h后，营养肉汤均匀混浊；37℃恒温培养48 h后，厌氧肉汤见白色悬浮物，鲜血琼脂平板上生长湿润的水滴样小菌落，其周围无溶血现象。挑取菌落接种麦康凯琼脂不生长。

根据临床症状、病理变化和细菌分离鉴定结果，诊断该病例为猪巴氏杆菌病。

1.2　试验分组与方法

1.2.1　试验分组及治疗方案　严格隔离病猪，用10 g/L石灰乳消毒圈舍场地，饲用器具、饲料及饮水用10g/L有效氯漂白粉彻底消毒。并在疫情控制后及时进行再次免疫。

将35日龄，体重5 kg～7kg，品种相同，健康状态相近或相似的发病猪只共110例，随机分为3组：①空白对照组，10头，深部肌肉注射灭菌生理盐水，用量同药物对照组；②药物对照组，50头，深部肌肉注射阿米卡星，剂量为7.5mg/kg，每天用药2次，连用5 d；③试验药物组，50头，深部肌肉注射阿米卡星脂质体，剂量为5.0 mg/kg，每天用药1次，连用3d，各组均处在同一饲养管理条件下饲养，管理方法和卫生水平较好。

1.2.2　判定标准

1.2.2.1　痊愈　用药3 d后完全恢复健康。

1.2.2.2　好转　治疗后患猪临床症状明显好转，用药3 d后症状减轻，食欲、体温恢复正常。

1.2.2.3　无效　治疗后患猪临床症状无明显改变，甚至死亡。

2　结果

试验猪只通过3 d的用药治疗，空白对照组病情日趋严重，有4头死亡。药物对照组和试验组治疗结果见表1。

表1　阿米卡星脂质体与阿米卡星对猪肺疫的治疗结果

Table 1　The therapeutic effects of liposomal amikacin and amikacinon pig pasteurellosis

上表经统计学分析，阿米卡星脂质体组仔猪成活率明显高于药物对照组(P<0.01)。

3　讨论

阿米卡星的抗菌作用机理主要是作用于细菌的30S亚基，抑制细菌蛋白质的合成，使合成异常的蛋白阻碍已合成蛋白的释放，使细菌细胞膜通透性增加而导致一些重要生理物质的外漏，引起细菌死亡而达到杀菌目的。阿米卡星抗菌谱广、活性强、具有良好的抗菌作用，其分子中具有某些特殊功能基团可免受细菌产生的钝化酶破坏，因而在细菌对其他氨基糖苷类耐药时，对阿米卡星仍敏感，而且很少产生耐药菌株。本试验表明阿米卡星在临床上对猪肺疫有较好的治疗作用，如果结合症状补充葡萄糖、维生素混合静注，疗效可能更显著。

试验结果表明，阿米卡星脂质体注射液较传统的阿米卡星注射液剂型有更显著的疗效。阿米卡星脂质体的抗菌作用可能是通过吸附、接触释放作用、膜融合作用等几种途径实现的。脂质体被吸附到细菌细胞表面，而后发生接触释放作用，引起脂质体膜渗透性增加，所包封的药物释放到菌体内，或者通过膜融合作用使脂质体内的药物直接进入菌体的细胞浆中。对照治疗试验说明将阿米卡星制成脂质体后可增强抗菌效果，减少使用剂量，提高疗效。

通过试验发现，阿米卡星脂质体在临床上不但治疗效果比阿米卡星好，而且用药剂量少，用药次数少，经济实用。据报道，阿米卡星脂质体与阿米卡星游离药物相比，半衰期是游离药物的7倍多，明显延长，表明阿米卡星经脂质体包封后，药物的有效血药浓度时间延长，从而能显著地提高药物抑杀菌效能，减少用药剂量。

阿米卡星脂质体治疗动物疾病平均比阿米卡星传统注射剂每头猪只节约0.1元～0.2元，大大降低了用药成本；而且由于用药次数减少，也节省了劳动成本并减少猪只的应激反应，经济效益显著。同时，由于传统注射剂频繁用药易造成可食性组织中药物蓄积，导致药残超标，而脂质体剂型因大大减少了用量，可食性组织中蓄积少，因而还具有显著的社会效益。