伊维菌素长效注射液对小鼠的急性毒性试验

摘　要：为考察伊维菌素长效注射液的急性毒性，用简化寇氏法对小鼠的LD50进行了测定。将伊维菌素长效注射液以1∶0.7的组间剂量给试验小鼠一次皮下注射，连续观察7 d。结果表明，伊维菌素长效注射液的LD50为257.04 mg/kg,95%可信限范围为192.84 mg/kg～342.61mg/kg，符合低毒标准，说明该药临床皮下注射使用安全。

关键词：伊维菌素；LD50；小鼠

伊维菌素是从土壤微生物阿佛曼链霉菌(Streptomycesavermitilis)发酵产生的半合成大环内酯类多组分广谱抗寄生虫药，对体内外寄生虫特别是线虫和节肢动物具有良好的驱杀作用。其作用机理主要通过增强虫体的抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的释放使虫体麻痹死亡。伊维菌素对马、牛、羊、猪的消化道和呼吸道线虫，马盘尾丝虫的微丝蚴以及猪肾虫等均有良好的驱虫效果。对马胃蝇和羊鼻蝇的各期幼虫以及牛羊的疥螨、痒螨、毛虱、血虱、腭虱以及猪疥螨、猪血虱等外寄生虫具有良好的杀灭作用。为了给临床用药提供依据，本试验对伊维菌素长效注射液的急性毒性(LD50)进行了测定。

1　材料与方法

1.1　试验动物

一级昆明小鼠100只，雌、雄各半，体重20 g±2 g，购于西安交通大学医学院实验动物中心。实验室温度控制在18 ℃～22℃，相对湿度40%～70%，雌、雄分笼饲喂，自由采食饲料、饮水。试验前临床健康观察7 d。

1.2　试验器材

普通托盘天平；手提式高压灭菌锅；灭菌注射器等。

1.3　供试药品

伊维菌素长效注射液，西北农林科技大学兽医药理实验室研制，批号：20070903。

1.4　试验方法

1.4.1　预试验　取小鼠20只，按序贯法进行预试验。分别找出伊维菌素长效注射液死亡率100%和0%的剂量。

1.4.2　正式试验　将小鼠随机分为7组，每组12只。按简化寇氏法设计组间剂量比r＝0.7，确定正式试验每组药物的剂量进行皮下注射。给药后连续观察7d，逐日记录动物的毒性反应情况和动物死亡的分布情况。

1.4.3　中毒症状观察　动物给药后，即刻开始观察动物外观体征、饮食、行为活动等情况及动物死亡情况，连续7d并记录观察结果。对死亡动物进行病理剖检，记录病变情况。

2　结果

2.1　预试验结果

皮下注射伊维菌素长效注射液后，死亡率100%的剂量为849.99 mg/kg，死亡率0%的剂量为100 mg/kg。

2.2　正式试验结果

结果见表1。

2.3　数据处理

2.3.1　半数致死量(LD50)的计算　半数致死量(LD50)按以下公式计算：

LD50＝log－1

式中：Xm为最大死亡率组剂量对数；i为相邻剂量比值的对数(此处i为log1.43)；∑p为各组死亡率总和。

将所得数据代入上式算得伊维菌素长效注射液对小鼠的LD50(小鼠)为257.04 mg/kg。

2.3.2　LD50的95%可信限(FL)的计算　LD50的95%可信限(FL)按以下公式计算：

FL＝log－1(logLD50±1. 96i0.5)

将所得数据代入上式算得伊维菌素长效注射液对小鼠LD50的95%可信限范围为：FL(小鼠)为192.84 mg/kg～342.61 mg/kg。

表1　伊维菌素长效注射液对小鼠急性毒性试验结果

Table 1　The results of acute toxicity test of long-actionivermectin injection in mice

2.4　中毒症状

有轻度中毒症状的小鼠主要表现为给药30 min后，出现食欲减退，呆立。大部分在给药后2 h～4 h活动增加，开始少量采食，12h后精神和采食状况恢复正常。

有严重中毒症状的小鼠主要表现为给药30min后，可见被毛竖立，小鼠全身颤抖，多数缩作一团，精神高度沉郁，呼吸浅表，不饮水，不采食。剂量越高出现症状的时间越短。死亡高峰在给药后6～12h。

2. 5　病理变化观察

对所有死亡动物进行剖检，可见肝脏肿大，颜色变为深褐色，有针尖状散在出血点分布于肝脏边缘；肾脏轻微肿胀，颜色变深；膀胱内充满黄褐色尿液；其他器官未见眼观病理变化。

3　讨论

本试验结果表明，伊维菌素长效注射液对小鼠的皮下注射LD50为257.04 mg/kg，其95%可信限范围为192.84 mg/kg～342.61 mg/kg，按毒性分级标准属于低毒性药物，为临床推荐用量(1.0 mg/kg)的250多倍，临床皮下注射使用安全。据徐霞等报道，伊维菌素脂质体的LD50为92. 1516 mg/kg，伊维菌素一般注射剂的LD50为24.2493mg/kg。由此可见，伊维菌素长效注射剂的急性毒性显著低于伊维菌素普通注射剂和伊维菌素脂质体注射剂，说明将伊维菌素制成长效制剂后，降低了原料药的毒性作用，增加了其安全性。