毒性实验

　　 （一）概述某一种新药或一个新的制剂，于临床使用前，必须经过这个步骤。虽然药物对人的作用，不完全能在动物身上表现出来，但对一个新药物来说仍是一个很有用的参考数据。因此，为保证病人的用药安全，新药在临床应用前一定要进行毒性试验。毒性试验的类型，可根据药物的性质及使用途径、方法和时间等加以选择。如有的药物后则产生中毒症状；有的药物需长期服用才能秦效等。因此，药物的毒性试验，应根据该药物的特点来决定。

（二）急性毒性试验（一般安全试验）取体重18－22g的健康不白鼠5只，由尾静脉（或腹腔）注射一定剂量的药液（容量以0.5ml为宜，可用注射生理水稀释成不同浓度），注射时间为4－5秒，观察有无不良反应（如惊厥、四肢瘫痪、步伐不稳、竖毛、呼吸抑制等）或死亡。主要以死亡为指标，注射后48小时内不得有死亡。如有死亡应加取小白鼠10只重新试验，全部小白鼠在48小时内不得有死亡（做过本试验的小白鼠不得重复使用）。

【注】①供试品静脉有困难时，可由腹腔注射，注射量仍为0.5ml，注射时间不限，注射后72小时内不得有死亡。

②若某一药物无安全试验剂量时，可将临床人用剂量乘以一定的安全系数然后再折算成小白鼠体重的剂量。安全系数大小，应根据该药物的纯度及临床试验情况而定，一般治疗性药物可定为50－100，需长期服用的药物可为100以上。

例：某注射液，***（按体重50kg计），每次注射量为4ml，安全系数为50，则小白鼠（按20g计）的给药剂量为：

小鼠剂量＝4×50／50000×20＝0.08ml

取该药0.08ml加0.9％氯化注射液稀释成0.5ml，作为供试品的注射用量。

③也可用同样方法试验（即某一剂量注入小白鼠内，若5只中只有1只死亡，则减剂量再试直至试出5只小白鼠均不死亡的最大剂量）。求出某药物的安全系数。

计算公式：

安全系数＝小白鼠最大耐受量×***体重（g）／***用量×小白鼠体重（g）。

例：某药特的剂量为4ml，当剂量为0.2ml（稀释至0.5ml），给小白鼠静脉注埋时引起死亡，减剂量再试，在0.16ml/20g时，没有反应，故含有苯甲醇的注射剂，对试验往产生干扰，应引起注意。

④苯甲醇对小白鼠有一定毒性反应，故含有苯甲的注射剂，对试验结果往往产生干扰，应引起注意。

（三）亚急性和慢性试验需要较长期投用的药物，应做亚急性或慢性毒笥试验。方法和急性毒性试验基本相同，按小白鼠体重计算，每在在口服或腹腔注射剂量为人用剂量的20－50倍，连续用药1－8周。慢性毒性，连续用3－6个月。在用药期间，应仔细观察试验动物的体重、进食量、进水量的变化，以及有无不良反应或死亡。动物在试验前后，均应做血象、肝、肾等功能检查，以资对照。试验中死亡或试验完毕的动物都要做解剖，观察内脏器管和组织切片检查。根据试验结果，判断可否用于临床。

【注】①亚急性，慢性毒性试验，均应设对照。这是由于的饲养环境和健康情况的不同个体差异往往很大，给药后内脏的变化如无空白对照组做比较，常使实验结果难以判断。

②非经口服的药品，应注意须灭菌后作用，以免动物被染而影响结果。

③毒性实验的给药途径，应尽量采用与临床应用的相同方法。给药途径不同毒性表现常是差别很大，如口服给药的LD50比静脉或腹腔注射的LD50大几十倍。

④毒性实验前，实验设计要考虑周密，应尽力避免实验中临时改变条件。实验用的动物，一般应在本实验室条件下2周以上，使动物适应环境后，再进行实验。

⑤实验室要注意加强对动物的管理，保持清洁卫生。对实验中途死亡的动物应做出客观的分析，以便正确总结判断。

⑥毒性实验中，除记录计量指标外，支动物的一般状态如兴奋、抑制、麻痹、呼吸、食欲、体重等应进行仔细地观察、对实验中药物出现作用的时间，速度以及毒副作用的特点等，均应严密观察，并详细记录，以便进行综合分析。

⑦在亚急性、慢性毒性实验中，应根据药物的性质和实验要求的不同，在给药前后以及实验时，对实验动物易发生毒性反应的主要器官进行检查。检查项目有：

A血象：包括血色红素、红、白细胞及分类计数等。

B肝功能：肝脏是机体重要的代谢器官，不仅对糖、蛋白质及脂类代谢起得要作用，也是许多药物在体内的解毒场所，故应进行肝脏功能的检查。

C肾功能：大部分药物从肾脏排泄，故应测定药物对肾功能有无损害及其损害的程度，其中包括血中非蛋白氮含量，小便常规检查。

D组织切片：可进一步了解药物对各脏器有无损害及其损害的程度。可将动物在不同的期内分批处死、取其心，肝、脾、肺肾、胃、肠等进行切片检查，并与对照比较，观察药物对各组织有无可逆或不可逆损害。

（四）半数致死量的测定半数致死量（简称LD50）是指药物引起实验动物半数死亡的剂量。由于个体差异，同一剂量的药物给同一动物，可以出现死亡或不死亡。而LD50在表示药物毒性时，比较灵敏，准确。一般以每kg多少mg表示（药物剂量／体重）

测定LD50常用动物为小白鼠，体重18－22g，雄雌均可（雌的不得怀孕）将不同性别和体重的动物均匀分成4或6组，每组10只。给药途径和临床应用相同，给药容量以0.5ml为宜。一般观察3天，以死亡为主要指标。