3类常用免疫增强剂的研究应用

随着免疫学的发展和相关学科的渗透，目前已出现了许多具有增强免疫功能的生物活性物质，现将常用的3类免疫增强剂的研究情况介绍如下。

一、 化学合成类免疫增强剂

一左旋咪唑

左旋咪唑是第一个被发现具有免疫调节作用的人工合成化合物，具有广泛的免疫调节活性，可促进细胞和体液免疫。左旋咪唑能增强正常鸡体液免疫应答反应，使鸡抗胸腺依赖性抗原抗体滴度、抗非胸腺依赖性抗原抗体滴度均明显升高。Hu等通过比较左旋咪唑、甲硝唑等5种含咪唑基团的化合物对人外周血淋巴细胞增殖的影响，发现左旋咪唑的免疫调节活性作用与咪唑基团有关，另外还发现咪唑类化合物可作用于cAMP磷酸酯酶，促进cAMP水解，从而促进淋巴细胞增殖。目前公认左旋咪唑的免疫调节活性作用机理存在3个方面：一是左旋咪唑具有拟胆碱能样活性，与咪唑基团有关；二是左旋咪唑能诱导机体产生各种淋巴因子；三是左旋咪唑的代谢产物具有清除自由基的功能。

对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用乔彦良等研究结果显示，高母源抗体雏鸡首次免疫鸡新城疫活疫苗前或免疫后，配合应用10毫克/千克体重左旋咪唑，对前期血清抗鸡新城疫病毒抗体滴度无明显影响,但能延长抗体高峰水平维持时间。新城疫疫苗二次免疫前应用10毫克/千克体重左旋咪唑，血清内抗新城疫病毒特异性抗体明显升高。AugeLov等(1984)在气雾免疫新城疫疫苗6天后,按7毫克/千克体重口服左旋咪唑，发现在鸡血清中的唾液酶、溶菌酶含量明显比只接种疫苗的鸡高；肖俊杰等(1991)报道，新城疫Ⅱ系苗中加入左旋咪唑-葡聚糖微粒,不仅能消除母源抗体对雏鸡的影响,而且能显著提高其免疫效果，尤其对感染传染性法氏囊病的雏鸡更为明显。刘玉常等(1992)报道,在给鸡注射新城疫Ⅰ系苗的同时服用左旋咪唑，能增强免疫效果。

对马立克氏病疫苗的免疫增强作用有关文献报道疫苗免疫的同时应用左旋咪唑，可明显促进马立克氏病疫苗接种鸡细胞和体液免疫功能，用药后外周血T淋巴细胞转化明显增强，血清内抗马立克氏病毒特异性抗体明显升高。KaLra(1979)等对接种了马立克疫苗的鸡，分别在接种的同时或接种后投予左旋咪唑，发现在240天以上的存活率明显比对照组高。

对鸡法氏囊疫苗的免疫增强作用韩雪清等报道雏鸡免疫前应用左旋咪唑(3.8、0.38、0.038毫克/千克)7～14天后即表现出免疫增强作用，且左旋咪唑还具有颉颃传染性法氏囊弱毒疫苗对新城疫疫苗免疫干扰的作用。乔彦良等报道用左旋咪唑处理传染性法氏囊病鸡，可促进其增重，恢复脾及法氏囊免疫活性细胞，用于正常鸡也可增加法氏囊重量指数及脾重量。

左旋咪唑在畜牧业中应用广泛，但最近几年欧盟和日本已禁止使用左旋咪唑作为肉鸡饲料添加剂，这将大大限制其在我国的应用。

二西咪替丁

西咪替丁为高效选择性H2受体颉颃剂，H2受体不仅局限分布于胃肠道，也广泛分布于淋巴细胞表面。因此，人们对西咪替丁调节组织胺的免疫抑制作用及其对免疫应答的其他作用进行了研究，证明西咪替丁具有促进机体免疫功能的广泛作用。研究还发现西咪替丁具有明显促进鸡体液和细胞免疫功能的作用。在细胞免疫中，特异性抗原可刺激淋巴细胞释放巨噬细胞移动抑制因子，使巨噬细胞功能活化，并抑制其游走运动，组织胺能抑制致敏淋巴细胞生成MIF,而西咪替丁能拮抗组织胺对MIF生成的抑制作用。有关研究还首次观察了西咪替丁对正常鸡细胞免疫的影响,发现西咪替丁可明显促进正常鸡体内T淋巴细胞增殖,使CD4+细胞百分比升高,CD8+细胞百分比下降，CD4+/ CD8+细胞比值升高，使鸡外周血淋巴细胞IL－2活性明显升高,表明西咪替丁具有明显促进鸡细胞免疫的功能。

在体液免疫中，西咪替丁可促进小鼠抗SRBC抗体产生，使破伤风毒素免疫小鼠体内破伤风抗毒素滴度明显增加,免疫原性较弱的抗原诱导的抗体滴度明显升高。研究结果表明，西咪替丁均能明显促进机体抗胸腺依赖性和非胸腺依赖性抗原抗体的产生,增强机体体液免疫功能。

对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用接种新城疫活疫苗前配合应用西咪替丁可明显颉颃母源抗体对疫苗免疫的影响,使机体维持较高抗体水平；疫苗接种后配合应用西咪替丁可明显加速抗体高峰水平的到来，并使抗体高峰水平维持时间延长。疫苗二次免疫前应用西咪替丁,可明显促进新城疫疫苗接种鸡的体液免疫功能，用药后血清内抗新城疫病毒特异性抗体明显升高。

对马立克氏病疫苗的免疫增强作用研究结果显示，疫苗免疫的同时应用10～100毫克/千克体重的西咪替丁，具有明显促进鸡细胞和体液免疫的功能，用药后外周血T淋巴细胞转化明显增强，血清内抗HVT特异性抗体明显升高。

三新鱼腥草素钠

新鱼腥草素钠为十二酰乙醛的亚硫酸氢钠加成物，为白色鳞片状、针状结晶或结晶性粉末，微臭。大量研究表明,新鱼腥草素钠对多种细菌有明显的杀菌和抑菌作用，同时还能提高血清备解素水平，增强白细胞和单核巨噬细胞的吞噬功能，提高脾内T、B细胞密度及增强NK细胞活性，促进免疫球蛋白形成。新鱼腥草素钠具有提高机体免疫力的作用，对感染性疾病的治疗有重要意义，朱善元报道，新鱼腥草素钠注射液具有提高鸡体抗新城疫病毒血凝抑制抗体效价和外周血CD4+/CD8+淋巴细胞比值的作用,其中，中剂量的新鱼腥草素钠与白细胞介素的免疫增强效果相当,并且这种影响作用呈现出一定的量效关系。合适剂量的鱼腥草素钠对提高机体的最佳免疫力有重要影响。

另外，还发现该药不仅是一种有效的免疫增强剂,还能够拮抗氟苯尼考导致的免疫抑制作用。

二、微生物来源类免疫增强剂

微生物来源类物质作为免疫增强剂的种类也较多，其中一些有益菌，如双歧杆菌既可增强消化功能的活性，同时也是免疫调节剂，还有一些细菌的细胞壁也具备良好的免疫调节功能，如分枝杆菌细胞壁的胞壁酰二肽。

胞壁酰二肽(muramyL dipeptide,MDP)是1974年ELLouz等从分枝杆菌细胞壁中分离得到的具有活性的最小结构片段，是分枝杆菌的主要免疫活性成分之一，其成分为N一乙酸胞壁酸一L一丙氨酸一D一异谷氨酰胺。它是弗氏全佐剂((FCA)的活性部分，单纯注射胞壁酰二肽即可增强机体非特异性的免疫功能，与抗原合用则可增强机体对多种抗原的免疫功能。

胞壁酰二肽虽然分子量很小，但有很强的佐剂活性，能增强体液和细胞免疫，提高疫苗、菌苗、病毒亚单位及寄生虫苗的保护力，其优点是注射局部反应轻微，极少发生局部化脓等不良反应；无抗原性和过敏原性，反复注射，不产生抗体也不产生过敏反应；无致癌作用；分子量小，对生物学降解作用有抵抗力，可以口服。胞壁酰二肽的主要作用是活化巨噬细胞，在注射部位形成肉芽肿，吸引吞噬细胞，诱导机体产生细胞因子，进一步增强吞噬细胞和淋巴细胞活性，使其更易捕获抗原。

胞壁酰二肽曾被认为是最有发展前途的佐剂之一。但胞壁酰二肽存在致热原性(pyrogenicity)，在动物体内会引起赖特尔过敏综合征，为了降低胞壁酰二肽的毒副作用，近几年对其分子进行系统化学改造的研究十分活跃，已报道的化学合成胞壁酰二肽衍生物或类似物己超过600种，其中最有效的是胞壁酰二肽亲脂性衍生物。研究表明，在水溶性胞壁酰二肽分子中引进各种长链脂肪酸及其它亲脂性基团，增加了该分子的亲脂性，而亲脂性在一定程度上与免疫佐剂的免疫增强效应呈正相关关系。

三、微量营养素类免疫增强剂

微量元素和维生素对机体免疫功能有重要作用，其中比较重要的有硒、锌、维生素A、维生素E、维生素D和维生素C等。

一硒的研究应用

硒对机体免疫功能有重要影响，它能促进B淋巴细胞产生抗体，缺硒时动物免疫水平降低。缺硒的鸡，抗绵羊红细胞的IgG滴度会明显降低，补硒后恢复正常。黄克和等证明日粮中添加适量硒可显著增强鸡淋巴细胞增殖和NK细胞活性，并可以减少雏鸡马立克肿瘤的发病和死亡。有关硒的免疫增强功能研究已经很多，现在人们已经把眼光转向硒的药物制剂方面和有机硒的研制开发方面。

在药物制剂方面，已研制开发了纳米硒，纳米硒对小鼠免疫系统的保护研究已经取得了较理想的结果。在有机硒的研制开发方面，已开发了多种有机硒，如硒代甲硫氨酸、硒酵母等。有关硒酵母与亚硒酸钠的生物学效率的比较，已通过试验测出，在改进奶牛、猪的缺硒状况方面，硒酵母的效率要比亚硒酸钠高。与无机硒相比，有机硒具有低毒高效、易于吸收的特点，无机硒――亚硒酸钠是最常用的硒补充剂，在畜牧业应用尤其广泛，但由于亚硒酸钠是毒性物质，稍一过量就会引起中毒，特别是幼龄动物更为敏感，且生物利用率不理想，这些都将大大地限制亚硒酸钠在实践中的应用。当前，人们越来越倾向于使用高效低毒的有机硒，如硒酵母，因此，有机硒将是未来的主导硒补充剂。

二维生素的研究应用

维生素E对维持机体正常的免疫功能具有重要作用，研究证明日粮中添加维生素E可使30日龄肉鸡血清中新城疫抗体滴度、IgG含量及淋巴细胞转化率提高，并呈剂量依赖关系。Franchini等发现维生素E具有佐剂作用，当用维生素E油代替灭活油苗中20%和30%的矿物油时，能使抗体滴度产生得更快更高。

有报道称饲喂维生素A缺乏的日粮可导致鸡胸腺和法氏囊发育受阻、萎缩，外周血淋巴细胞转化率降低，白细胞数及淋巴细胞数减少，血清抗体浓度下降，高剂量维生素A可显著降低大肠杆菌导致的死亡，增强体液免疫反应和巨噬细胞的吞噬能力，并使新城疫抗体滴度提高，补体活性及溶菌酶活性升高，维持最佳免疫反应的维生素A需要量远远高于维持最佳生产性能的需要量。

近年来，随着免疫学研究的不断深入和新型免疫增强剂的不断发现，免疫增强剂的研究发展很快，今后对免疫增强剂的研究，一方面要建立更好的体外模型，以筛选更多的免疫增强剂，同时更好地估价免疫增强剂在机体中的免疫活性；另一方面也要注意其安全性问题，临床前期试验非常重要。FDA和MAID(变态反应及感染性疾病研究所)规范了用以评价免疫增强剂的疫苗免疫效果及安全性问题所要完成的实验，新的免疫增强剂必须要用这些标准方法来评价。因此，理想的免疫增强剂应该能促进抗原(包括弱免疫性抗原)引起体液和细胞介导的免疫，而且不引起有害的副作用；能以不同途径免疫，也能用于不同抗原；能在免疫抑制个体中发挥作用；应用于食用动物不应留有毒素残留；能有效影响免疫反应质量(型的控制、局部免疫以及细胞类型的控制)；稳定、便宜而且容易产生。骄阳技术部