摘 要：用粪肠球菌人工感染羔羊，复制粪肠球菌病病理模型。病理组织学观察可见病羊大、小脑有微血栓形成；大脑有噬神经和卫星化现象；肝细胞、肾小管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血；脾脏的动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节。结果表明，粪肠球菌引起羔羊出现的神经症状是非化脓性脑炎引起的，同时还伴随败血症变化。
关键词：粪肠球菌；病理组织学；绵羊
粪肠球菌是链球菌科、肠球菌属中的一员，为条件性致病菌，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，广泛分布于自然界中，一般栖居在各种温血和冷血动物的腔肠，甚至昆虫体内，在动物粪便中检出率较高。
目前该菌多作为生活饮用水、管道水和一些水质的指示菌，作为监测水质卫生和环境卫生质量的污染指标具有卫生学意义。据有关报道，大量的(109以上)肠球菌可以引起食物中毒，有些国家已经制定了针对肠球菌污染限量标准，从预防食物中毒方面，保障人的身体健康考虑，我国应借鉴国外标准，制定适宜的污染限量指标。
人类肠球菌的感染几乎均由粪肠球菌引起的，粪肠球菌为体内感染的重要病原菌，不仅可以引起人类尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。在畜牧生产中，粪肠球菌引起羔羊发生以败血症和神经症状为主的疾病，羔羊的病死率达到20%，对畜牧业生产造成很大的损失。在人类和动物，粪肠球菌都存在着潜在的危险性。本试验把从病死羔羊体内分离到的经鉴定为粪肠球菌的菌株，人工感染羔羊，观察其病理组织学变化，为该菌的致病机制和防治提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株 石河子大学动物科技学院兽医微生物学实验室从发病绵羊脑内分离、鉴定为粪肠球菌的菌株。
1.1.2 绵羊 美利奴细毛羊 2只 ，本地品种绵羊1只，30日龄，体重约 10kg，均为雄性。试验羊为舍饲，饲料为青贮玉米、苜蓿草、杂草及少量混合饲料，饲喂1周观察绵羊各个体征及体温正常。
1.2 方法
1.2.1 感染绵羊 采用颈静脉注射法，每只注射1.0mL菌悬液(6.0×1010个/mL)。感染后每天上、下午各测温一次，观察精神、食欲、粪便等变化。
1.2.2 采集病料及回收细菌 病死及出现典型临床症状时的羊扑杀、剖检，采集脑、心血、肝、脾等回收细菌并观察各组织器官的病理变化，同时采取有病变的组织，福尔马林(100mL/L)固定，常规石蜡包埋，组织切片，HE染色，光镜观察。
2. 结果
2.1 剖检观察
2.1.1 整体外观 体质消瘦，胸前皮下水肿，病羊血液黏稠，呈黑红色。
2.1.2 脑 大脑脑膜上有几个针尖大小出血点，切面有淡黄色液体流出，脑组织水肿，小脑切面散在针尖大小出血点，海马角和延脑也有针尖大小出血点，脑脊液增多，较浑浊。
2.1.3 肝脏 肝脏呈紫褐色，边缘肥钝、肿大，表面有散在的、大小不一的出血点，胆囊高度肿大，胆汁黏稠。
2.1.4 肾脏 肾脏表面有不规则的淤斑，被膜粘连，不易剥离，切后组织外翻；肾盂充血；膀胱积尿。
2.1.5 脾脏 整个脾脏变薄呈灰色，边缘呈锯齿状，同时脾脏表面有梗死灶。
2.1.6 淋巴结 淋巴结肿大，颜色暗红，切面呈大理石样。
2.1.7 心脏 心冠沟处有少量针尖大小出血点。
2.1.8 肺脏 肺脏肿大，边缘尖锐，气管、支气管有多量黏液。
2.2 光镜观察
2.2.1 心脏 心肌纤维间质增宽，内有水肿液。心肌细胞浆内可见微细颗粒，部分区域有大量淋巴细胞浸润，心肌纤维间毛细血管扩张、充血，部分区域心肌纤维断裂、坏死，心肌纤维间有许多红细胞(图1A)。
2.2.2 小脑 脑膜水肿、增厚、血管扩张充血(图1B)，毛细血管内可见微血栓形成，小脑内普肯野氏细胞肿大、变圆、轴突消失，胞浆内尼氏体溶解，核偏位，甚至发生核溶解(图1C)。
2.2.3 大脑 大脑皮质部的毛细血管周围和神经细胞周围间隙扩大，充满大量的水肿液。毛细血管中可见微血栓形成。有“噬神经和卫星化现象”。有些区域发生液化性坏死，大脑多呈长条形或圆形区域，染色浅淡，呈疏松网状，其中有泡沫细胞散在分布(图1D)。
2.2.4 肺 肺泡壁毛细血管扩张充血，间质增宽，有些区域的血管和细支气管周围有大量淋巴细胞浸润(图1E)。
2.2.5 肾 肾间质弥漫性分布大量红细胞，肾小管上皮细胞发生颗粒变性、坏死，肾小球体积增大，肾小球毛细血管扩张充血(图1F)。
2.2.6 肝 肝细胞颗粒变性、坏死，血管周围有大量上皮样细胞包围，淋巴细胞浸润(图1G)，肝窦状隙充满大量红细胞。
2.2.7 肠 小肠黏膜层及黏膜下层毛细血管扩张充血，肠腺萎缩，数目减少。
2.2.8 脾脏 脾脏白髓的中央动脉周围淋巴组织鞘由于淋巴细胞、上皮样细胞增生而变大(图1H)。中央动脉壁周围出现有大量上皮样细胞，同时在动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节，有些区域出血。
3 讨论
从小脑和大脑的病理组织学变化来看，小脑血管扩张充血，毛细血管内有微血栓形成，神经细胞急性肿胀，神经细胞液化，大脑皮质部神经细胞有噬神经和卫星化现象，有些区域发生液化性坏死多呈长条形或圆形区域，染色浅淡，呈疏松网状，内有泡沫细胞。这些说明该羔羊发生的是非化脓性脑炎，出现的神经症状是非化脓性脑炎的表现。这与医学上报道粪肠球菌引起化脓性脑炎不相符，其致病机制有待于进一步研究。
从脾脏的病理组织学变化看，脾脏中央动脉周围淋巴组织鞘体积增大，这表明粪肠球菌感染引起畜体产生免疫反应是以细胞免疫反应为主。脾脏中央动脉壁周围出现有大量上皮样细胞，同时在动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节，这说明该细胞免疫是巨噬细胞介导的免疫应答，同时表明粪肠球菌进入畜体后可以在巨噬细胞内聚居并存活以逃避宿主免疫系统的清除。这与国外报道该菌可在巨噬细胞内存活的试验一致。
从心脏、肾脏和肝脏病理组织学来看，这3种脏器都有出血和淤血，这是败血症的变化。
粪肠球菌是机会感染菌，它在机体免疫功能低下，外界环境比较恶劣的情况下易引起机体发病，因此在防治上要从提高机体免疫力和创造良好的外界环境入手。
A.心肌出血，坏死(×40)；B.小脑脑膜水肿、增厚、充血(×10)；C.小脑毛细血管内有微血栓形成，神经细胞肿胀，神经细胞液化(×40)；D.大脑液化性坏死(×40)；E.肺泡壁毛细血管充血，间质增宽，细支气管和血管周围有大量淋巴细胞浸润(×10)；F.肾间质出血(×10)；G.肝血管周围有大量上皮样细胞，淋巴细胞浸润(×40)；H脾脏白髓的中央动脉周围淋巴组织鞘由于淋巴细胞、上皮样细胞增生而变大(×10)
A.Hemorrrhage and necr*** ofmyocard(×40)；B.Edema，thickness，condestion of cerebellummeninges(×10)；C.Microthrombosis in capillaries ofcerebellum，swelling of neuron，liquefaction ofneuron(×40)；D.Liquefactive focus in cerebrum(×40)；E.Alveolarcapillary is dilated and filled with blood，alveolar septem isthick，Infitrated with numerous lymphocytes is seen around abronchilole and blood vessels(×10)；F.Hemorrhage ofkidney(×10)；G.Infiltration of lymphocytes and epithelioid cellsaround liver blood vessels(×40)；H.Periarteriolar lymphoid sheath insplenic white pulp is obviously increased with proliferation ofT-lymphocytes and epithelioid cells(×10)
图1 病理组织学变化
Fig.1 Changes of histopathology
分享到：
展开全文