第一种方法是物理鉴别法,就是对黄芪多糖的物理性质从望、闻、尝、摸、溶五个方面进行鉴别。
首先是望,望就是看黄芪多糖粉的颜色,真正的黄芪多糖粉应该是淡黄色粉末,具有吸湿性,如果放入瓶中上下摇晃时可出现挂壁现象,若假冒的黄芪多糖粉中加入了葡萄糖粉,那么将黄芪多糖粉放在铺平的白纸上可看到有白色的颗粒;如果加入了麦芽糖糊精复合物,黄芪多糖粉的颜色则表现为深黄色。
其次是闻,闻就是闻黄芪多糖粉的味道,由于黄芪多糖粉是从植物黄芪中提取的,所以真正的黄芪多糖粉可闻到青草的味道,而假冒的黄芪多糖粉则多是加入了化学成分,往往闻不到青草的味道。
再次是尝,尝就是尝它的口感,黄芪多糖从字面的意思来看是糖,好像应该甜,但是事实上只有单糖才有甜味,而黄芪多糖是多糖,它并没有甜味,如果假冒伪劣的黄芪多糖粉中加入了蔗糖复合物,就会品尝到其中的甜味。
第四是摸,也就是用手摸黄芪多糖粉的手感,真正的黄芪多糖粉刚开始用手摸时,会感觉光滑细腻,但是由于它具有吸湿性,很快就会有沾手的感觉,而假劣的黄芪多糖粉由于加入了其它成分,往往表现为没有吸湿性或者吸湿性不明显,不会有沾手的感觉。
最后一点是溶,溶就是指溶解性,黄芪多糖粉中的黄芪决定了它的溶解性良好,不会有不溶性成分沉淀,但是溶解速度比较慢,如果黄芪多糖粉中加入了蔗糖复合物、葡萄糖复合物、麦芽糖糊精复合物、糊精水溶性淀粉复合物等物质,都会出现溶解速度过快的现象,而且还有可能出现不溶性的沉淀物质。
另外,将黄芪多糖粉进行溶解后,由于其中含有皂苷成分,因此会出现很多泡沫,而假冒的黄芪多糖粉泡沫较少或没有泡沫。除此以外,还可以看到真正的黄芪多糖溶解速度较慢,但是可以完全溶解,而假冒的黄芪多糖溶解速度较快,但是溶解后容器底部往往有不能溶解的物质。
第二种方法是化学鉴别方法,化学鉴别方法有3种,即醇沉法(80%)、高热法(350℃)和高效薄层色谱仪鉴别法,常用的是醇沉法和高热法,高效薄层色谱仪鉴别法对仪器和操作人员要求较高,在基层不常用。
首先是80%酒精醇沉法,它的原理就是利用不同的酒精浓度能够沉淀出不同分子量大小的物质,如50%的酒精能够沉淀出蛋白质、淀粉、粘液质、果胶等大分子物质(溶液会呈现黏稠状或有黄色沉淀物质);80%的酒精能够沉淀出具有活性的黄芪多糖(出现乳白色絮状沉淀,为国家三类新兽药标准); 90%以上的酒精能够沉淀出葡萄糖、蔗糖。
可取黄芪多糖粉10克放入烧杯,加水20毫升水溶解后,同时再加入乙醇80毫升搅匀静置沉淀,上清液为浅棕色,底部有大量沉淀,并聚集成团状,说明该样品即为未加入葡萄糖的黄芪多糖;若沉淀物较少,则说明该黄芪多糖粉中掺入了葡萄糖。
将上述液体放入4℃冰箱静置约2小时后,可见黄芪多糖溶液底部出现乳白色絮状沉淀,而假劣黄芪多糖溶液只呈现浑浊现象,没有沉淀生成。最后将静置的溶液倒出,黄芪多糖溶液中的絮状沉淀随液体一块倒出,无沉淀物附着于瓶底,而假劣黄芪多糖有沉淀物附着于瓶底(提取黄芪多糖时发生断裂,未除去蛋白质果胶、粘液等杂质),或者干脆没有沉淀物生成。
其次是高热法,高热法就是取黄芪多糖粉适量于350℃下高温加热2小时,待冷却后,残渣应呈硬块状,如果黄芪多糖中含有葡萄糖,那么在350℃的干热条件下,2小时后即呈现蜂窝状,由此,也可对黄芪多糖的真伪做出鉴别。
最后一种是高效薄层色谱仪鉴别法,这是目前鉴别黄芪多糖最有效的方法,通过对薄层斑点的判断,可以辨别样品的真伪,即供试品色谱中,真正的黄芪多糖粉与对照品色谱相应的位置上,应显相同颜色的荧光斑点。
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