猪精液品质检测和稀释分装储存操作

　　人工授精技术在规模化猪场较为常用，现已普及各中小猪场。目前我国实施猪人工授精比率约为60%，且以年均5%的速度递增。随着猪人工授精技术的普及，该技术成为猪场繁殖的关键，一定程度上影响猪场整体经济效益。因此，保证猪精液质量成为猪场盈利的重要任务。采精后，精液要经过品质检查、稀释、分装及储存环节，目前各猪场技术人员素质参差不一，尤其是中小养殖场，规范操作无从谈起。

　　1精液品质检测

　　猪精液品质检测是把控精液质量的首关，只有经筛选合格的精液进行稀释粉装才能确保母猪受孕率。精液品质检测可分为宏观检测和微观检测，宏观检测包括采精量、颜色、气味三个指标，微观检测包括酸碱度(pH)、活力、密度和畸形率四个指标。

　　1.1采精量

　　采集精液后称重，不同品种公猪的射精量有较大差异，其中常见的杜洛克、大白猪和长白猪的平均单次正常射精量为150mL～220mL，随季节变化公猪采精量有所波动，尤其是春季较其他季节量大。如果发现公猪精液量骤减或者骤增，应该进一步对猪精子密度和活力进行检测。通常情况下精液量骤减是由于公猪疾病或采精频率过大造成，而精液量骤增很可能采精操作不规范混入公猪尿液，这两类精液均不可用，应予以淘汰处理。

　　1.2颜色

　　通过肉眼观察精液颜色，正常的精液是乳白色或浅灰色，精子密度越高，色泽愈浓，透明度愈低。带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。

　　1.3气味

　　采精完成后敞开装精液容器，用扇闻法检查精液气味是否正常，正常猪精液略带腥味，如有腥臭味或其他异常气味，应及时废弃。

　　1.4 pH

　　适宜的pH环境是精子存活的必要条件，且pH对精子影响较较大，以pH计或pH试纸测试，正常鲜精pH为7.1～7.5，过高或过低的pH应当废弃，否则不利于后续储存。

　　1.5活力

　　精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率，是检测精子是否具有受精能力的重要标准。在显微镜下观察，一般按0.1～1.0区间的10级评分法估计，鲜精活力要求不低于0.7。检查活力时要求载玻片和盖玻片都应在37℃下预热，并在滴入精液后迅速观测评级，活力较低精液及时淘汰。

　　1.6密度

　　精子密度指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要标准。要求用血细胞计数板计数或有条件猪场使用精子密度仪测定。血细胞计数方法：以微量加样器取具有代表性原精液200uL，用3%NaCl稀释10倍;在血细胞计数板上放一盖玻片，取1滴稀释液后精液置于计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内;在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数，将该数乘以50万，即得到原精液每毫升所含的精子数(即精液密度)。在实际生产中，有经验的技术员可以通过肉眼直接估测精子密度。应注意的是，这种快速方便的方法应建立在有丰富经验的基础上，建议技术员在前期进行科学手段检测，不断积累经验，以防估测值偏差较大。杜长大公猪原精液中精子密度为3～4亿/mL，精子密度异常反映精液质量，应舍弃密度过低的精液。

　　(6)畸形率

　　畸形率是指异常精子的百分率，根据《种猪常温精液标准》(GB 23238-2009)规定，种猪原精液中精子畸形率Q20%。猪精子畸形率测定可用普通显微镜，但需伊红或姬姆萨染色，利用相差显微镜可直接观察活精子的畸形率。公猪使用过频或在高温环境下会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多，如巨型精子、短小精子、双头或双尾精子、顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲的精子等。要求对每头公猪每2周检查一次精子畸形率。

　　2 精液稀释、分装、储存和运输

　　2.1稀释液

　　精液稀释液按商品配方提前配制，并及时贴上标签：标明品名、配制日期、时间及经手人等信息。在冰箱内4℃条件下保存，不超过24小时。通常在精液采集前将稀释液置于水浴锅37℃水浴30分钟左右。

　　2.2确定稀释倍数

　　《种猪常温精液标准》(GB 23238-2009)规定每剂量中直线前进的精子数为R25亿，因此稀释倍数为：原精液总有效精子数/精液瓶容积(一般为80mL集精瓶)。原精液总有效精子数=原精液体积(或重量g)×精子密度(单位：个/mL)×活力。

　　2.3精液稀释

　　精液采集后应尽快稀释，原精储存不超过30分钟。未经品质检查或检查不合格的精液不能稀释。稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不超过1℃，当室温变化精液温度不稳定时，以精液温度为标准调节稀释液的温度，绝不能反过来操作。稀释时，将一个塑料杯(1000～1500mL)放在电子秤上去皮，将装精液的采精袋从保温杯中取出，放入这个大塑料杯中，并将袋口翻在杯外。如果集精容器为一次性纸杯，则需将纸杯中的精液倒入装集精袋的塑料杯中并放在电子秤上，也可在此时称量并记录精液重量。然后向杯中徐徐加入与精液等温的稀释液，直至达到稀释倍数。

　　2.4精液分装

　　一次性输精瓶的分装。是将塑料杯中稀释后的精液分别加入不同的输精瓶中，使精液面达到输精瓶上相应的刻度处(如80mL)，然后轻微挤出集精瓶内空气后拧紧瓶盖并贴上标签。

　　2.5精液储存

　　将分装后的集精瓶放入泡沫盒中，用毛巾掩盖防止光线直射，在室温下缓慢降温30分钟，再将泡沫盒放入17℃恒温箱内保存。保存过程中尽量做到不频繁打开保温箱，并且每隔12小时轻轻翻转一次，防止精子沉淀而引起死亡。短效稀释液可保存3天，中效稀释液可保存4～6天，长效稀释液可保存7～9天，无论何种稀释液保存精液，都应尽快用完。

　　2.6精液运输

　　由于热应激或冷应激，以及紫外线的影响，精液品质会发生变化，降低精子活力。因此，精液运输应置于保温较好的装置内，温度控制在16～18℃。精液运输过程中应避免强烈震动。

猪精液品质检测和稀释分装储存操作