以前已有若干研究显示,精子细胞膜的完整性与受精率存在相关。用荧光DNA染料对人工制造的细胞膜破损的镜子细胞进行定时染色,观察荧光强度。
方法
利用不能穿透细胞膜的染料Hoechst 33258 ( H258)和碘化丙啶(PI)来测量细胞膜破裂的精子细胞核的荧光强度,利用能够穿透细胞膜的染料Hoechst 33342 (H342)来测量完整精子细胞核的荧光强度。
人工授精单剂中精子浓度在31.2× 106至50 × 106/ml之间,平均为3550 × 106/ml。
每头公猪连续采集三次精液,中间间隔一周。把第一次授精后60天内未返情比例(NR%)和经产母猪窝产仔数(总产仔数)当作衡量受胎率的指标。
结果
用H258和H342染色处理的精液荧光强度与经产母猪窝产仔数呈显著相关,PI染色的荧光强度的相关则不显著,其中H258为r=-0.68 (P<0.01),H258为r=-0.69 (P<0.01),PI为r=-0.38, (P=0.11)。
结论
膜损坏精子H258染色和膜完整精子H342染色荧光读数的增加与人工授精后窝产仔数的减少存在相关关系。
这个发现显示,可以利用精子细胞核的荧光特性作为评估人工授精精液的授孕潜力。
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