文章详细
（一）兽医免疫学及微生物学基本知识
A、选择题
1、 炭疽杆菌抵抗力强是因为该菌存在（ C ）。
A． 质粒? ?? B． 溶原状态
C． 芽胞? ?? D． 荚膜
2、 正常动物受到抗原刺激后，体内首先出现的抗体是（ B ）。
A． IgA????? B． IgM?????
C． IgE????? D． IgG
3、 鸡马立克氏病常用的血清学诊断方法为（ C ）。
A． HI??????? ??????????B． 病毒中和试验?
C． 琼脂扩散试验?????? D． ELISA
4、 炭疽病死畜不能剖检的原因是（ B ）。
A．炭疽杆菌大??????? ??????B． 炭疽杆菌能形成芽胞
C．炭疽杆菌能形成荚膜????? D． 炭疽杆菌不易检测
5． 抗体再次应答的特征之一是（ D ）。
A． 潜伏期较长 B． IgM产量较高
C． 抗体亲和力低 D． 抗体维持时间长
6、 下列微生物中属于真核微生物的是（ B ）。
A．细菌 ??? B．酵母
C．病毒 ? D．霉形体??
7、 病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，产生毒性代谢产物，引起严重的全身中毒症状称为（ C ）。
A、 毒血症 B、 菌血症
C、 败血症 D、 脓毒血症
8、 需用抗酸染色法进行初步诊断的细菌是（ D ）。
A、 大肠杆菌 B、 炭疽杆菌
C、 沙门氏菌 ? D、 结核杆菌
9、 IgG经木瓜酶水解后，所得能与抗原结合的片段是（ A ）。
?A、 Fab???? ?????B、 Fc??????
C、 F(ab)2????? ??D、 pFc
10、 抗体初次应答具有的特点是（ B ）。
A、 潜伏期短 ????B、抗体含量低 ???
C、 维持时间久?? D、 亲和力强
11、 光滑型菌落的菌落性状为（ B ）。
A．光滑、湿润、边缘不整齐 B．光滑、湿润、边缘整齐
C．粗糙、湿润、边缘不整齐 D．粗糙、枯干、边缘不整齐
12、 隐性感染是指（ A ）。
A．动物已经感染病原但未有临床症状 B．动物在即将感染病原前的状态
C．动物已经感染病原并有临床症状 D．动物未感染病原也未有临床症状
13、 热空气灭菌法常用温度和维持时间是（ B ）。
A．121℃，15-20分钟 B．160℃，2-3小时
C．100℃，15-20分钟 D．115℃，30分钟
14、 干烤灭菌法常用温度和维持时间（ A ）。
A．160℃，2-3小时 B．121℃,15-20分钟
C．100℃，15-20分钟 D．115℃，30分钟
15、 高压蒸汽灭菌采用的温度和时间是（ A ）。
A．121℃，15-20分钟 B．160℃，2-3小时
C．100℃，15-20分钟 D．132℃ ，1-2秒钟
16、 典型的支原体菌落呈（ B ）。
A．光滑型 ? ?B．荷包蛋样
C．无固定形状 D．粗糙型
17、 典型的大肠杆菌菌落的性状为（ B ）。
A．光滑、湿润、边缘不整齐 B．光滑、湿润、边缘整齐
C．粗糙、湿润、边缘不整齐 D．粗糙、干燥、边缘不整齐
18、 炭疽杆菌在感染的动物体内，形态上通常是（ A ）。
A．有荚膜、无芽胞 B．有鞭毛、有芽胞
C．有荚膜、有芽胞 D．无荚膜、无芽胞
19、 引起断奶仔猪水肿病的病原体是（ A ）。
A．大肠杆菌 ? B．沙门氏菌
C．多杀性巴氏杆菌 D．轮状病毒
20、引起鸡白痢的病原体是（ D ）。
A．禽腺病毒 ? B．禽流感病毒
C．鸡新城疫病毒 D．沙门氏菌
21、引起禽霍乱的病原体是（ C ）。
A．禽腺病毒 ? ?B．禽流感病毒
C．多杀性巴氏杆菌 D．沙门氏菌
22、下列病原体中，能引起羊流产的是（ A ）。
A．布氏杆菌 ? ?B．大肠杆菌
C．分枝结核杆菌 D．嗜血杆菌
23、下列细菌中，属于革兰氏阳性菌的是（ A ）。
A．葡萄球菌 ? B．大肠杆菌
C．多杀性巴氏杆菌 D．嗜血杆菌
24、下列细菌中，属于革兰氏阳性菌的是（ D ）。
A．布氏杆菌 ? B．沙门氏菌
C．大肠杆菌 D．分枝结核杆菌
25、下列微生物中，属于严格细胞内寄生的是（ D ）。
A．大肠杆菌 ? B．沙门氏菌
C．巴氏杆菌 D．衣原体
26、下列微生物中，属于严格细胞内寄生的是（ B ）。
A．细菌 ? ?B．病毒
C．真菌 D．酵母
27、 下列微生物中，能垂直传播的病原体是（ B ）。
A．大肠杆菌 ? B．沙门氏菌
C．痘病毒 D．嗜血杆菌
28、 在一定时间内能使特定动物发生半数死亡的最小微生物量或毒素量，称为（ B ）。
A．MLD ? B．LD50
C．MID D．ID50
29、 在一定时间内能使特定动物在感染后全部死亡的最小微生物或毒素量，称为（ A ）。
A．最小致死量 ??? ?B．半数致死量
C．最小感染量 D．半数感染量
30、 在一定时间内能使特定动物发生半数感染的最小微生物量或毒素量，称为（ D ）。
A．最小致死量 ??? ?B．半数致死量
C．最小感染量 D．半数感染量
31、 观察病毒的常用方法是（ C ）。
A．光学显微镜观察 B．油镜观察
C．电子显微镜观察 D．普通10倍放大镜观察
32、 病毒复制过程的一般顺序是（ D ）。
A．侵入、吸附、脱壳、生物合成 B．侵入、脱壳、吸附、装配和释放
C．侵入、生物合成、脱壳、装配和释放 D．吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放
33、 下列病毒中，无囊膜的是（ C ）。
A．鸡马立克氏病病毒 B．鸡新城疫病毒
C．口蹄疫病毒 D．禽流感病毒
34、 下列中病原体中，可以引起怀孕猪流产的是（ A ）。
A．呼吸繁殖障碍综合病毒 B．大肠杆菌
C．传染性胃肠炎病毒 D．传染性腹泻病毒
35、在下列病毒中，具有凝集鸡红细胞特性的是（ D ）。
A．鸡传染性喉气管炎病毒 B．鸡马立克氏病病毒
C．鸡传染性支气管炎病毒 D．禽流感病毒
36、 下列病毒中，属于是DNA病毒的（ B ）。
A．口蹄疫病毒 B．马立克氏病病毒
C．新城疫病毒 D．禽流感病毒
37、病毒的血凝与血凝抑制实验属于（ A ）。
A．凝集试验??? ?????B．沉淀试验??????
C．补体结合试验???? D．中和试验
38、 用牛肉膏作培养基能为微生物提供（ D ）。
A．C源??? ??????????B．N源 ??
C．生长因素? ???????D．A、B、C都提供
39、大肠杆菌在某种培养基上形成红色菌落，该培养基属于（ B ）。
A ．营养培养基 ?????B．鉴别培养基?
C．选择培养基 ??????D．厌氧培养基
40、 大部分细菌生长的最适pH是（ B ）。
A．7.0～7.5?? ????B．7.2～7.6???
C．8.5～9.0? ?????D．6.4～6.6
41、 对动物注射免疫血清，属于（ A ）。
A．人工被动免疫?? ??B．人工主动免疫??
C．天然主动免疫? ???D．天然被动免疫
42、疯牛病的病原体是（ B ）。???
A．类病毒? ??????????B．朊病毒
C．拟病毒 ???????????D．蛭弧菌
43、 革兰氏染色法经过乙醇脱色、复染步骤后，革兰氏阴性菌（ B ）。
A．呈现蓝紫色 ???????B．呈现红色
C．呈现无色???????? ?D．呈现深绿色。
44、 革兰氏染色法经过乙醇脱色、复染步骤后革兰氏阳性菌（ A ）。
A．呈现蓝紫色 ???????B．呈现红色
C．呈现无色 ?????????D．呈现深绿色。
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B、判断题
1、 单个细菌是肉眼看不见的，但细菌的群体――菌落是肉眼可见的。（√）
2、 细菌的基本形态包括球状、杆状和螺旋状。（√）
3、 所有细菌都具有致病性。（×）
4、 细菌的荚膜成分常常是构成细菌毒力的因素之一。（√）
5、 细菌芽胞对外界不良理化因素的抵抗力较繁殖体强得多。（√）
6、 湿热的穿透力比干热强，湿热的灭菌效果更好。（√）
7、 因为紫外线穿透力差，所以只用于动物体表及空气等消毒。（×）
8、 动物病原性细菌的培养温度大多数为37℃。（√）
9、 煮沸消毒能杀死芽孢。（×）
10、 消毒剂对动物机体细胞和微生物都有毒性。（√）
11、 支原体能进行人工培养。（√）
12、 猪喘气病的病原体是一种支原体。（√）
13、 核酸是微生物的遗传物质。（√）
14、 病毒只能在活细胞体内复制。（√）
15、 大部分病毒既含有DNA又含有RNA两种核酸。 （×）
16、 口蹄疫病毒主要感染偶蹄兽。（√）
17、 鸡传染性法氏囊炎病毒、鸡传染性贫血病毒能导致感染鸡发生免疫抑制。（√）
18、 怀疑为细菌性传染病的病料，若不能立即进行细菌分离工作，应先将病料冷冻，以免被杂菌污染。（×）
19、 发现疑似炭疽病畜尸体，应立即解剖取病料送检。（×?）
20、 血清学检验几乎不受温度的影响。（×）??????????????????????
21、 机体内病毒感染的表现形式和结果由病毒、机体和环境条件三者的综合作用决定。（√?）
22、 鸡新城疫病毒接种鸡胚的部位是绒毛尿囊腔。（√?）??????????????????????????
23、 口蹄疫病毒能感染牛、猪、山羊和绵羊。（√?）????????????????
24、 伪狂犬病其特征为发热、奇痒及脑脊髓炎。但是成年猪常为隐性感染，可有流产、死胎及呼吸系统症状。（√?）????????????????????? ?????????
25、 T细胞是具有免疫活性的胸腺依赖性淋巴细胞，执行细胞免疫。（√?）
26、 B细胞是在非胸腺依赖区由多能干细胞分化增殖产生的免疫活性细胞，执行体液免疫。（√?）
27、 疫苗的运输应防止高温、暴晒和反复冻融。（√?）
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C、简答题
1、试述病毒的血凝现象及其在诊断上的重要意义？
答：病毒的血凝现象：许多的病毒表面有血凝素，能与鸡、豚鼠的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称病毒的血凝现象。当加入与病毒相特异的抗体时，则抑制了病毒凝集红细胞的特性。例如：用于诊断鸡的ND、流感、流行性乙型脑炎。
2、活苗与灭活苗的优缺点？
答：活苗优点：使用剂量小，免疫产生快。缺点：毒力返强，冷冻保存。
灭活苗优点：方便安全，容易保存。缺点：免疫期短，使用剂量大。
3、简述影响化学消毒剂作用效果的因素。
答：（1）消毒剂的浓度和作用时间：消毒剂浓度越大，作用的时间越长，杀菌效果就越好。但应注意例外，酒精在70-75%时杀菌的效果最强，而其浓度过高，会使菌体表面的蛋白迅速凝固，使酒精无法渗入菌体内部发挥作用。
（2）温度和酸碱度：通常温度升高，消毒剂的杀菌作用也增强。消毒剂的杀菌作用也与酸碱度有关。不同消毒剂有不同的最适酸碱度，如酚类消毒剂在酸性环境中的效果比较好。另外，细菌在适宜的酸碱度抵抗力较强，如果偏离其最适的酸碱度，细菌就很容易被杀死。
（3）细菌的种类和数量：不同种类的细菌对消毒剂的敏感性不同，细菌的数量越大，所需的消毒剂浓度就越高，作用时间就越长。所以应根据细菌的种类和数量来选择消毒剂的种类和浓度。
（4）环境中的有机物和其他拮抗物的影响：不同的化学消毒剂有其各自的拮抗物质。细菌也经常与血液、痰液和脓液等有机物混合在一起。这些混杂物可和消毒剂结合，从而影响化学消毒剂的杀菌作用。
4、简述血清学实验的影响因素。
答：（1）电解质：常用生理盐水，促进可见现象的发生。
（2）温度：适宜的温度可增加抗原、抗体活性及相互接触的机会。
（3）pH：pH=6-8较合适；pH=5-5.5，非特异性沉淀；pH=2-3，解离。
（4）振荡：振荡加速反应；但过速可解离。
（5）杂质：蛋白质、脂质、糖类杂质时，抑制反应进行或引起非特异性反应。故试验设立对照。
5、抗原性质有哪些？
答：抗原的性质：包括免疫原性与反应原性。免疫原性：指抗原能刺激机体产生抗体和效应淋巴细胞。反应原性：指抗原与相应的抗体或致敏淋巴细胞发生反应的特性。
6、病毒的培养方法有几种，各自特点。
答：（1）动物接种：病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖，并使动物产生特定的反应。优点：操作方面易行。? 缺点：受机体免疫力的影响，常需要用无菌动物。运用：分离、增殖病毒，疫苗效力试验，疫苗和抗血清的生产。
（2）鸡胚培养：一般用9-12日龄的鸡胚，分别接种于卵黄囊内，羊膜腔，尿囊腔等部位。病毒生长的标志为鸡胚死亡、畸型和出血。用于病毒分离与疫苗生产。
（3）组织培养：在离体活细胞上培养病毒的方法
1）组织块培养：取组织片（如一段胎儿气管或一小块鼻黏膜）进行培养。
2）细胞培养：病毒感染细胞后，大多数引起细胞病变，称为病毒的致细胞病变作用。表现为细胞变形，胞浆内出现颗粒化，核浓缩、核裂解等。
7、免疫程序应当包括那些要素，制定免疫程序的依据？
答：免疫程序要素：疫苗接种的间隔时间，次数，接种方法，剂量等，动物品种、年龄，疫苗种类。
依据：（1）当地疾病流行情况及其规律。
（2）根据畜禽的种类、用途、饲养管理条件、畜禽及其产品上市的旺季。
（3）母源抗体的水平。
（4）疫苗的种类、性质、免疫途径及免疫期。
8、巴氏消毒法的内容？
答：利用高温杀死物品中的病原菌或一般杂菌，同时又不致严重损害食品质量。加温61-63℃加热30min，或71-72℃加热15-30s,然后迅速冷却到10℃左右，可将其中的非芽孢病原菌杀死。常用于葡萄酒、啤酒及牛奶等食品的消毒。
9、简述病毒鉴定常用方法
答：中和试验、补体结合试验、病毒的红细胞凝集和红细胞凝集抑制试验、荧光抗体试验、免疫酶标记技术和免疫扩散试验、聚合酶链式反应（PCR）和基因序列分析。
10、免疫血清学检测技术有哪些类型？
答：免疫非标记技术主要包括凝聚性反应（凝集试验、沉淀试验）、补体结合试验、中和试验（病毒中和试验、毒素中和试验）和免疫标记技术（标记荧光素、酶分子、金属颗粒、乳胶颗粒、放射性同位素等）。
11、凝集试验的特点何在？直接凝集试验与间接凝集试验有何异同？
答：细菌、红细胞等颗粒性抗原，与相应抗体结合，在有适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集试验。参与的抗体主要为IgG、IgM。凝集试验可用于检测抗原或抗体，优点是操作简便。
（1）直接凝集试验? 颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现凝集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分玻片法和试管法两种。
（2）间接凝集试验? 将可溶性抗原(或抗体)吸附在不溶性颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接凝集反应。间接凝集试验敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。
12、简述疫苗的种类。
答：疫苗包括活苗和灭活苗、联苗与多价苗、寄生虫疫苗、类毒素、亚单位组份苗和基因工程苗。
13、简述作为菌种、毒种应具备的条件。
答：菌种、毒种是决定疫苗质量的最重要的因素。是国家的重要生物资源，一般的菌种、毒种必须具有良好的免疫原性和安全性、具有典型的生物学性状、血清型与疫苗使用地区流行的病原相符、遗传性状稳定、历史及有关资料清楚完整。
14、简述佐剂的分类及常用佐剂。
答：（1）不溶性铝盐类佐剂，主要是氢氧化铝胶，其次是明矾及磷酸三钙等。
（2）油水乳剂佐剂，此类佐剂最著名的有弗氏佐剂。
（3）蜂胶佐剂，蜂胶是蜜蜂采自柳树、杨树、栗树和其他植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂腊、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。
（4）微生物及其代谢产物佐剂，如结核杆菌，破伤风类毒素和分枝杆菌细胞壁的一些成分等。
（5）人工合成佐剂，如海藻糖合成衍生物等。
（6）其他类型佐剂，如免疫刺激复合物佐剂、细胞因子类佐剂、非离子阻断共聚物表面活性剂佐剂、核酸及其类似物佐剂和左旋米唑佐剂等。
15、简述疫苗运输与保存应注意的事项。
答：疫苗的运输需注意防止高温、暴晒和反复冻融。活苗需低温保存。如放入冰瓶或冷藏箱内。北方寒冷地区要避免疫苗冻结或因温度高低不定而引起反复冻结和融化。切忌将疫苗装入衣袋内，以免因体温较高而降低效力。冻干苗应在－15℃下保存，如猪瘟兔化弱毒冻干苗在－15℃可保存一年。一些国家的冻干苗因使用耐热保护剂而保存于4-6℃。多数活疫苗只能现制现用，在0-8℃可短期保存。灭活苗可在2-15℃下保存。
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D、问答题
1、论述当动物发生细菌类疾病时，请应用微生物学知识做出诊断，请详细写出诊断步骤。
答：（1）细菌的检验、形态检查：
取致死畜禽的组织或血液制成血液涂片或组织触片，经染色，然后在显微镜下观察，对于一些具有特征形态的病原体，可鉴别。
复染色法：如革兰氏染色法
（2）细菌的分离培养：
1）细菌的生长表现：在固体培养基上生长为菌落。表现：大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度，表面光滑、粗糙、有无光泽。在液体培养基：所有细菌能在其扩散生长。表现：浑浊、沉淀、形成菌环、细菌膜等。
2）细菌的分离：用人工培养方法将细菌从病料或某一个菌落移植到新的培养基中培养分离出来，称细菌的分离。
（3）细菌的生化试验：
（4）动物试验：接种于动物，通过动物的症状、病理变化、染色、细菌培养、生物化学实验、免疫学技术，检验细菌。
（5）免疫学诊断：
?1）凝集试验?????????? 2）沉淀试验?????????? 3）补体结合试验。
2、 试述炭疽病的微生物学诊断方法。
答：疑似炭疽死亡动物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。
（1）涂片镜检? 取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。
（2）分离培养? 取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。
（3）动物试验? 将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。
（4）血清学试验? 常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。
3、 口蹄疫病毒的分型及其对温度抵抗力特点？
答：口蹄疫病毒有7个血清型，分别命名为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3以及亚洲1型。各型之间几乎没有交叉免疫力，同一型之间又有不同的亚型。我国流行的主要有O、A、C型。口蹄疫病毒在低温能长期保存，但易被热灭活。
4、简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。
答：（1）病料的采集和处理? 可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织，按1：5的比例假入灭菌的生理盐水或缓冲液，用研磨器将组织研碎制成20%的悬液，反复冻融2-3次，5000r/min离心20分钟，取上清，用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。
（2）分离培养? 将处理好的病料经尿囊腔接种9-11日龄无母源抗体的鸡胚，37℃孵育，每天照蛋2次，弃除24小时内死亡胚，收集24 -96小时死亡胚，96小时内未死亡胚取出。
（3）收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性，对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒，采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。
确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定--致病性试验。
5、制备细菌培养基的一般程序有哪些？细菌培养基按照用途可分为哪几类？
答：制备培养基的一般程序包括：称量、加热、溶解、调酸碱度、过滤、灭菌、分装。
按照用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基。
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