猪瘟、高致病性猪蓝耳病和口蹄疫免疫程序优化

gscnsl 网络 2019-12-27 09:17:17
摘 要:本文通过6组不同免疫程序下对猪瘟 (HC)、高致病性猪蓝耳病 (HPRRS)和口蹄疫 (FMD)免疫效果进行跟踪监测,分析每一组免疫程序下各疫病的免疫抗体水平,发现HC的免疫抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小;HPRRS的提前单独免疫可能促进猪瘟抗体的产生,HPRRS的免疫抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小;口蹄疫合成肽疫苗的抗体水平在HPRRS提前单独免疫后,下降明显,两者之间是否存在相关,还需要进一步试验佐证。

关键词:猪瘟;高致病性猪蓝耳病;口蹄疫;免疫程序;免疫效果

猪瘟 (Swine Fever, Hog Cholera, HC)、高致病性猪蓝耳病 (High Pathogenicity Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, HPRRS)、和口蹄疫(Foot and Mouth Disease, FMD)是目前危害养猪生产的主要传染病,最有效的预防方法就是免疫注射。世界动物卫生组织(OIE)将HC、FMD列为A类家畜传染病,将HPRRS列为B类传染病,同时将这三种疫病列为世界范围内重要传染病研究行列[1,2]本试验通过6组不同免疫程序下对HC、HPRRS 和FMD免疫效果进行跟踪监测,分析每一组免疫程序下各疫病的免疫抗体水平,旨在确定更符合连云港地区猪群的免疫程序。现报告如下。

1 材料和方法

1.1 试验动物

连云港市某自繁自养规模猪场提供的母猪及仔猪。

1.2 疫苗

猪瘟疫苗(以下简称HC)、高致病性猪蓝耳病疫苗(以下简称HPRRS)、口蹄疫合成肽疫苗(以下简称VP1苗)及猪O型口蹄疫灭活浓缩疫苗(以下简称206苗)均使用的是政府招标统购苗。

1.3 检测试剂和判定

猪瘟抗体ELISA试剂盒(批号:T4413040)和猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体ELISA试剂盒(批号:T4404071)购自韩国安捷公司、猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒(批号:201403004)购自上海优耐特生物公司以及口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒 (批号:2014060301)购自中国农业科学院兰州兽医研究所,试验操作和结果判定按说明书要求进行。

1.4 分组方法及免疫程序

本试验共分为6组进行,分别为A、B、C、D、E和F组,每组12头仔猪(注:免疫过程中有个别应激死亡,所以实际试验数据每组不满12头),每组的免疫程序均有所不同,试验分组及免疫程序详见表1。

表1 试验分组及免疫程序

猪瘟、高致病性猪蓝耳病和口蹄疫免疫程序优化

1.5 样品采集及检测方法

仔猪一免前采血,检测血清中HC、HPRRS及FMD母源抗体水平;之后在60、70、102和135日龄分别采血,检测血清中HC、HPRRS、FMD的抗体水平。检测方法及步骤按试剂盒说明书进行操作和分析。

2 结果与分析

2.1 HC苗的免疫效果

图1为6组免疫程序下不同采血时间猪瘟抗体的检测结果。从图中可以看出,一免前HC的抗体水平除B组外,其他5组的HC抗体合格率都在70%以上,说明仔猪在胎儿期间已经获得了母源抗体。仔猪60日龄(即HC二免后14天)时,6个试验组的HC抗体群体合格率均达到了很高水平,之后A组的HC抗体水平持续下降到较低的水平,可能该组的猪群受到了HC病毒的侵袭,由于仔猪本身的抗体水平较高,HC病毒只是中和了猪群本身的一部分抗体而并未对猪群致病;B组的HC高抗体水平维持到102日龄(即二免后56天)开始下降,随后抗体水平又出现上升现象,可能该猪群中存在HC病毒的一过性感染;C、D、E、F组的HC抗体均在很长一段时间维持在一个较高的水平,完全符合加强免疫后,抗体在14~21天迅速上升至很高的水平并维持很长一段的时间的规律,因此本试验中的C、D、E、F组的猪瘟免疫程序能较好地抵抗HC病毒的侵袭,保护猪群。与A组相比,C组是HPRRS提前免疫组,C组的HC的抗体水平在二免后的24天、55天和89天均高于A组,这说明HPRRS的提前免疫有利于HC的免疫效果。

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图1 HC苗免疫抗体结果

注:图中A~F表示免疫程序

2.2 HPRRS苗的免疫效果

从图2中可以看出,免疫前HPRRS的抗体水平都较低,群体抗体合格率均在40%以下,本次试验仔猪免疫前的采样日龄是15天,文献报道HPRRS的母源抗体可以维持到断奶前后,也就是28天左右,说明仔猪在胎儿期间没有获得足够的母源抗体,有的甚至没有获得母源抗体。到60日龄时,即HPRRS免疫后的30天,6个试验组的HPRRS群体合格率均达到了很高水平,除A组外,其他5组的群体抗体合格率都在80%以上,直到135日龄时猪血清中的抗体水平仍较高,群体合格率均达到100%。本次试验所使用的是HPRRS弱毒疫苗,因此可以看出只需使用HPRRS弱毒疫苗对猪群进行一次免疫,就能使猪群得到很好的保护,而不受其他免疫程序的影响,这也符合金光明[3]等的研究,其研究表明仔猪进行HPRRS弱毒苗免疫后的第110天采用同源强毒感染,动物可得到完全保护,而且对强毒感染的保护甚至是终生的。

2.3 VP1苗的免疫效果

从图3中可以看出,免疫前VP1的抗体水平都较高,群体抗体合格率都在70%以上,说明仔猪在胎儿期间已经获得了很好的VP1母源抗体。A、B及C组对口蹄疫的免疫,未采用VP1苗,两次免疫都采用206苗,结果显示,二免后A、B及C组VP1抗体水平持续下降。D、E及F组对口蹄疫的免疫,首免采用206苗,二免采用VP1苗,结果显示二免后此3组VP1的抗体都维持在较高的水平。根据免疫学原理:206疫苗是O型口蹄疫的全病毒灭活疫苗,经206疫苗免疫后产生的是全病毒抗体,同时因为是灭活疫苗,所以免疫后产生抗体的时候较长,且必需经过二免才能达到理想的免疫抗体水平。而VP1疫苗是口蹄疫病毒结构蛋白上的一个多肽片段,经VP1疫苗免疫后所产生的是病毒结构蛋白抗体,由于VP1是表达蛋白,且蛋白抗原小而单一,纯度高,免疫进入动物体内后不需要像病毒那样需要复杂的识别和提呈过程,所以能很快产生针对病毒结构蛋白的抗体。笔者曾经做过206苗和VP1苗免疫后的免疫抗体水平对比试验,发现猪的VP1苗在一免后14天就能产生较高水平的抗体,并且高抗体水平能维持很长一段时间,而猪的206苗二免后抗体群体合格率都很难达到80%,这次的试验结果也与之前相符。同时对比A和C两组免疫程序与结果发现,206苗同样的免疫剂量与免疫日龄,C组的抗体下降较A组更快些,这可能与HPRRS的免疫先后有关。

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图2 HPRRS苗免疫抗体结果

注:图中A~F表示免疫程序

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图3 VP1苗免疫抗体结果

注:图中A~F表示免疫程序

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图4 206苗免疫抗体结果

注:图中A~F表示免疫程序

2.4 206苗的免疫效果

从图4中可以看出,一免前猪O型口蹄疫抗体都处在极低的水平,调查发现生产该猪群的母猪之前的免疫程序中所使用的均为口蹄疫VP1疫苗,所以血清中没有检测到针对206苗的母源抗体的存在。A、B、C、F四组的O型口蹄疫抗体在60日龄(即二免后14天)均有不同程度的提高。而二免使用VP1苗的D、E两组的O型口蹄疫抗体滴度均很低,群体抗体合格率均不合格。其中A组的猪O型口蹄疫抗体水平在二免后24天开始下降;B组的猪O型口蹄疫抗体水平维持在一个较高的水平,直至135日龄(即二免后89天);C组的O型口蹄疫抗体水平呈现起伏状态,60日龄(即二免14天)时,抗体水平得到提高,70日龄时迅速下降,102日龄时抗体水平再次上升,但群体的合格率始终没有达到70%,疫病风险始终存在,猜测当HPRRS先于206苗免疫时,会影响206苗的初次免疫效果。此外,与A组相比,B组分别在一免和二免时增加了1 mL 206苗的免疫剂量,结果显示B组在二免后不同时间点的抗体水平均高于A组,这表明增加206苗的免疫剂量与提高猪O型口蹄疫的免疫效果可能存在正相关关系。

3 讨论

从本次试验的结果中可以看出,HC免疫后抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小,只要肉猪在养殖期间进行两次免疫,就能刺激机体产生较高水平的抗体,保护肉猪免受HC病毒的感染而引起生产性能的下降,同时,如果对肉猪进行HPRRS的提前单独免疫可能对猪瘟抗体的产生具有促进作用。HPRRS免疫后抗体水平受其他疫苗的免疫程序影响较小,只要对猪群进行一次弱毒苗的免疫,就能刺激机体产生较高水平的抗体,保护其在养殖期免受HPPRS病毒的感染,但同时我们也发现,HPRRS的母源抗体水平持续时间并不像以前文献报道的那么长,而目前大部分养殖场推行的免疫程序是在仔猪断奶前后(28天左右)进行初免,因此存在HPRRS抗体的免疫空白期,在此期间如果仔猪受到HPRRS病毒的感染,则会对整个猪群的生产性能造成较大影响,因此,最好将HPRRS的免疫时间稍微向前调整。

同时,由于HPRRS是免疫抑制性疾病,在HPRRS提前单独免疫后VP1抗体水平下降较其他组明显;将HPRRS作为首免疫苗,206苗作为后免疫苗,猪群O型口蹄疫抗体水平呈现起伏状态,群体的合格率始终低于70%,说明HPRRS苗与206苗免疫的先后顺序影响206苗的免疫效果;不能满足我国现行的重要动物疫病的防疫要求。在此基础上,在一免和二免时分别将206苗的免疫剂量由1 mL增加至2 mL,有助于获得更高的免疫抗体水平。华树明[4]研究表明:O型FMD、HC和HPRRS疫苗同时分点注射后,FMD抗体效价合格率不高,免疫效果不佳;HC抗体效价合格率较高,免疫效果较好。虽然我们的试验不是同时分点注射的,但就试验结果来说与上述研究存在一定的相似性。

综上所述,为了获得最好的组合免疫效果,应合理缩短HPRRS的免疫空白期。建议在实际免疫的时候,在保持HC免疫时间点不变的情况下,将HPRRS疫苗的免疫时间点稍微向前调整,同时在接下来的免疫程序中增加206疫苗的免疫剂量,有助于肉猪获得更为有效的免疫抗体,从而保证肉猪在养殖期间的健康,以降低养殖风险,增加养殖效益。

参考文献 略(资料来源:互联网)

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