防疫大数据｜猪｜蓝耳病原2017年上半年检测汇总及防疫建议

防疫大数据｜猪｜蓝耳病原2017年上半年检测汇总及防疫建议

2017年1月份至6月份，广东永顺生物制药股份有限公司客户服务部从全国各地送检的156个猪场共380份样品当中，检测到蓝耳病病毒核酸阳性有78个猪场，一共133份样品，即蓝耳病原场阳性率为50%（78/156），样品阳性率为35%（133/380），可见目前猪场的蓝耳带毒排毒现象非常普遍。检测结果详细介绍如下：

参照GB/T 18090-2008 猪繁殖与呼吸综合诊断方法和GB/T 27517-2011 鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法，以及从NCBI下载蓝耳毒株的基因（组）序列，分别针对蓝耳病病毒N基因、nsp2基因和gp5基因设计特异性引物，对全国各地猪场病料（含血清）中的蓝耳病病毒进行RT-PCR检测。

针对N基因（ORF7）的引物为：

P1：5’-GCG GAT CCA TGC CAA ATA ACA AC-3’

P2：5’-AGC TCG AGT CAT GCT GAG GGT GA-3’

扩增片段为372bp。

针对nsp2基因的引物为：

P3：5’-GGT TCG GAA GAA ACT GTC GG -3’

P4：5’-AGC AGG TGG AAG AAG CGA ATC -3’

P5：5’-GAG CTG AGT ATT TTG GGC GTG-3’

P3/P5引物对扩增片段为400bp可判为变异株，P4/P5引物对扩增片段为264bp可判为经典株。

2017年1月份至6月份蓝耳病原样品阳性率统计见表1和图1，发现蓝耳病原样品阳性率在15.6%至49.3%之间变化，上半年平均来看可以说三份样品当中大概就有一份是蓝耳病原阳性，可谓是“蓝天之下一片蓝”呀！

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当然，如果计算蓝耳病原阳性场的阳性率，结果还会更高一些；如果计算蓝耳抗体阳性场的阳性率，估计结果更会再高出许多。2017年1月份至6月份蓝耳病原阳性场的阳性率统计见表2和图2。从图表可知，上半年刚好有一半的猪场是蓝耳病原阳性场。可见，蓝耳病病毒已经普遍在猪场里面“定居”，当然，也不排除有部分病毒是疫苗毒，毕竟蓝耳活疫苗免疫后也可以在血液以及组织器官里面出现比较长时间。

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将上半年的蓝耳病原阳性样品进行送样测序，成功测定了共97株蓝耳病病毒的gp5序列。应用DNAStar软件把该97株gp5基因序列和美洲型变异株、国内经典株、美国经典株、GM2类重组毒株、NADC-30类毒株以及欧洲型毒株相应的gp5基因序列进行分析和比较，并利用MEGA 6软件绘制系统进化树（见图3）。

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将该97株序列按省份、分型来列表，可见变异株有61株，GM2类重组毒株有25株，NADC-30类毒株有11株。（见表3、图4~7）请点击此处输入图片描述

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一般来说，根据nsp2基因是否缺失90个核苷酸来判断是否高致病性蓝耳病毒株，但反向遗传早已显示是否缺失该90个核苷酸与毒力没有必然联系，因此建议高致病性毒株改称为“变异株”更为合适。

从2017年上半年蓝耳毒株测序分型统计图表可知，当前流行的蓝耳毒株是以变异株为主流。但是，由于当前使用蓝耳变异株活疫苗，因此不能完全排除检测到疫苗株的可能。NADC-30类毒株主要集中在华北平原，但东北、广东也有出现，其流行范围增大了；GM2类重组毒株盘踞广东，在东北也有发现，其流行范围也已变广了。

在猪场蓝耳有波动的情况下，建议感染前免疫安全性好的活疫苗，当然要避免潜伏期免疫。然而，蓝耳病毒往往和其他病原混合感染，用“潮流术语”称为“蓝耳+”，其防控难在免疫蓝耳活苗可能激发处于潜伏期的其他病暴发，应引起高度重视。