全面认识猪伪狂犬病

　　伪狂犬病(Porcine pseudorabies，PR)又名狂痒病，猪疱疹病毒病，奥其基氏病，阿捷申氏病。是由伪狂犬病病毒引起的猪和其他动物共患的一种急性传染病，病的特征为发热、奇痒（猪除外），脑脊髓炎的症状。猪是该病毒的自然宿主和贮存者，仔猪和其他易感动物一旦感染伪狂犬病病毒，死亡率高达100%，成年母猪和公猪多表现为繁殖障碍以及呼吸道症状。但成年猪常为隐性感染，可有流产、死胎及呼吸症状，哺乳仔猪除呈脑脊髓炎和败血症综合症状外，还侵害呼吸、消化和生殖系统，本病有时感染人，但不引起死亡，所以兽医人员在剖检时必需小心，防止通过破损皮肤感染。

　　据文献资料报道本病1813年前后就存在于美国，1902年匈牙利学者Aujesjky首次认定本病是与狂犬病不同的一种独特型的疾病，并报道了发生在牛、狗和猫的病例，此病因此得名为Aujesjky氏病。1910年， Schmiedhoffer证明本病是由一种滤过性病毒引起的。1931年Shope提出在美国称为奇痒的传染病在血清学上与伪狂犬病有一致性。1933年Traud用组织培养方法分离病毒获得成功。目前，除澳大利亚外，世界许多国家均有报道，而且发病率不断上升。我国于1947年在家猫中发现本病，1956年在宝泉岭农场仔猪群中发生了本病的流行，以后一些地区陆续有牛、猪发生本病的报道。目前，除澳大利亚外，世界许多国家均有报道，而且发病率不断上升。近年来，猪伪狂犬病在我国部分地区的有扩大的趋势（任裕其等，1994年）。本病据日本的矢换辉武报道，近年来有的猪场常迸发以由放线菌属感染引起的胸膜炎，或巴氏杆菌属、霉形体等微生物的混合感染。造成了一定的危害。

　　病原

　　本病病原属疱疹病毒科(Herpesviridae)疱疹病毒亚科，水痘病毒属的成员，与其同属的还有1型牛疱疹病毒(BHV-1)、马疱疹病毒(EHV)以及水痘带状疱疹病毒(vsv)。猪疱疹病毒属成员，疱疹病毒粒子呈圆形或椭圆形，直径为150～180nm，核衣壳直径为105～110nm，G+C含量为73%，二十面体对称，有囊膜和纤突。

　　本病毒具有泛嗜性，能在许多细胞中增殖。病毒可在各种哺乳动物细胞上生长繁殖，产生核内包涵体，大多数学者采用胎儿或新生动物的肾、睾丸制备细胞增殖病毒。猪、牛、兔、戈、猫、猴、驹和雪貂的肾细胞培养物，牛的睾丸细胞培养物以及鸡胚成纤维细胞均能用于增殖该病毒。传代细胞如人的HeLa细胞、羊膜细胞、Hep-2，D6细胞，牛的MDBK，猪的PK-15， SK6、PS、IBRS-2细胞，猴的Vero细胞、GMK细胞，兔的EP细胞和仓鼠的BHK-21细胞也能用于增殖该病毒。在这些细胞可引起细胞病变和蚀斑。据认为毒力较低的毒株能产生较大的蚀斑，感染细胞形成大的合胞体，许多细胞含有A型核内包涵体。本病毒亦可在鸡胚绒毛尿囊膜上生长，接种后3～4d能形成大小不一的隆起的白痘斑，病毒可以通过鸡胚的卵黄囊、尿囊腔、尿囊膜中继代适应后，可于接种后2～3d致死胚体并使全身出血水肿。另外，本病毒在首先适应了鸡胚后，还可用猴肾细胞培养之。尽管以上细胞都能用于增殖伪狂犬病病毒，但表现的敏感度不同，其中以兔肾和猪肾（包括原代细胞和传代细胞）最适于病毒的增殖。细胞被伪狂犬病病毒感染后其细胞病变，表现为截然不同的两种形式，一是感染细胞中度变圆或形成巨大的合胞体，另一种是细胞变圆、固缩，折射率增加，但无合胞体形成。这两种形式的病变是由所采用的毒株和细胞决定的。实验动物也可用于病毒的分离。在兔、1日龄小鼠和组织培养之间对伪狂犬病病毒的敏感性无显著差异，但成年鼠对伪狂犬病病毒较新生鼠有较强的抵抗性。虽然鸡胚对伪狂犬病病毒不很敏感，但应用鸡胚作绒毛尿囊膜接种是最早用于病毒增殖和传代的方法，卵黄囊和尿囊腔接种途径，同样可用于病毒的增殖培养。（引自陈光春）

　　PRV只有一个血清型，但毒株间存在差异。但将病毒的DNA用限制性内切酶切断时，可将日前已分离到的PRV毒株分为四个类型(I、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)，美国、德国、荷兰、日本和比利时分离株为 I、Ⅱ和其中间型，丹麦、瑞典等北欧国家的分离株为Ⅲ型，泰国为Ⅱ、Ⅳ型。

　　PRV基因组：PRV基因组为线性双链DNA分子，长约150kb，至少包括70个基因，足以编码70～100种病毒蛋白。基因组GC含量在疱疹病毒中最高，达73%。基因组被内部重复序列(IR)分成独特的长区段(UL)和独特的短区段(US)，US的另一端是末端重复序列(TR)。至今，有近40个PRV基因被确定和测序，其中有IR中的IE、Rsp40基因； US区中的gG、gD、gE、gI、llKD、28KD基因；UL区中的gB、gC、gH、gL、TK、Pol、MCPICP18.5基因。疱疹病毒基因组的转录呈现串联样的协同调控模式。PRV感染后转录的第一个基因是立即早期基因(IE)，在没有细胞蛋白合成的情况下，它就被转录，它编码调控蛋白。至今只鉴定出一个PRVIE蛋白(IE180)，IE蛋白激活早期基因(E)的表达。这些基因都在病毒DNA复制启动前转录。E蛋白在病毒DNA复制、核酸代谢及毒力方面有作用，如 DNA结合蛋白(DBP)、胸苷激酶(TK)等。早期一晚期基因(EL)在DNA复制前就开始转录，但之后才达到最高表达水平。晚期基因(L)只在DNA复制后才表达，大多数是编码病毒的结构蛋白。

　　PRV糖蛋白：已发现九种病毒糖蛋白，按照1993年第十八届International Herpesvirus Workshop命名分别为gB( glI)、gC( gIII)、gD( gp50)、gE(91)、gI( gp63)、gL、gH、gG (gX)和gK（括号内为93年前命名）。其中前七种糖蛋白是病毒的结构蛋白，位于囊膜上，gG则是一种分泌蛋白，gK是最近刚发现的，资料不详。结构蛋白在介导感染和诱发免疫应答方面具有重要作用。已知gB、gD、 gH和gL是病毒复制所必需的，而gC、gE、gI是非必需的。

　　糖蛋白在病毒吸附、穿膜、释放、膜融合、细胞-细胞扩散、神经入侵能力及毒力等方面都有关。 gB是经蛋白酶酶解加工形成的两个亚单位以二硫键连接的同源二聚体。gB是最保守的、最主要免疫原性蛋白，也是病毒复制所必需的。gC是病毒的吸附蛋白，它与细胞表面带有硫酸肝素碳水化合物链的粘蛋白相互作用，引导病毒与靶细胞的初级结合，它还与病毒从细胞释放有关。gD识别另一种细胞表面受体，介导病毒与靶细胞的稳定结合。gE在病毒入侵能力和毒力方面具重要作用。gB、gD、gH、 gL是病毒囊膜与细胞胞浆膜以及细胞胞浆膜之间融合过程中所必需的。gH和gL形成异源二聚体，很可能作为一个功能单位。gE和gI形成PRV的另一个异源二聚体，不过没有gI存在时，gE仍能发挥一定作用。在病毒直接的细胞一细胞扩散方式中，gH-gL和 gB起主要作用，而gE-gI对该过程有明显的促进作用，gD则是不必要的。抗gB、gC、gD抗体无需补体就具中和作用，抗gE抗体也有一定的中和作用，但需要补体；猪抗gC多克隆抗血清在多形核白细胞( polymor phonuclear)存在时，还具有较高的ADCC活性，但gB、gD的ADCC活性则很弱。

　　PRV毒力：PRV的毒力是受多基因／蛋白控制的。决定PRV毒力的蛋白可分为三类：①囊膜糖蛋白，如gE、gI、gC等；②病毒自身所编码的酶，如胸苷激酶(TK)、核糖核酸还原酶、蛋白激酶、碱性核酸外切酶、脱氧尿苷三磷酸酶；③非必需的衣壳蛋白。病毒编码的调控核酸代谢的酶是疱疹病毒毒力的主要决定因子。TK对病毒在中枢神经系统的复制过程起着主导性作用，灭活TK可使毒力大大降低，但不影响病毒在组织中的复制。gE对PRV在神经系统中扩散有重要影响，缺少gE的PRV只能局限性神经感染。研究表明缺失gE全部或仅缺失Val-125和Cys-126两个氨基酸都将导致毒力显著降低。gE-突变株对神经系统的侵入能力降低，可能是因为：①在鼻黏膜形成较小的蚀斑使感染神经组织的范围变小，感染神经元的数量减少；②病毒的释放受到限制；③病毒在神经突触处细胞一细胞传播受到影响；④病毒经三叉神经途径的顺行传播受到影响。此外，与亲本毒相比，gE-突变株在猪肝、肾、肾上腺、脾等内脏中的病毒滴度低得多。gI-突变株虽然仍能侵人中枢神经系统，但感染神经元的数量明显减少，其毒力介于亲本毒与gE-突变株之间。gC缺失毒株对新生仔猪毒力没有降低，但对三周龄猪则毒力减弱，其机理尚不清楚。在没有gE存在时，gC则成为决定毒力的主要糖蛋白。gG对病毒的毒力没有影响。PRV虽只有一个血清型，但毒株之间的毒力有差别。60～70年代，出现了强毒变种，近年来，又报道了毒力很低的野外毒株的存在，而Hahn等从美国野猪中分离的PRV毒力也明显减弱，其本质仍有待于研究。（引自童光志）

　　本病毒的抵抗力较强，在畜舍内的干草上夏季能存活30天以上，冬季可存活46天，56℃30min可以被灭活。把病毒保存在50%的甘油生理盐水中，在冰箱温度可存活154天，而滴度几乎不降低。在4℃或-7℃可保存多年，腐败11天，腌渍20天可杀灭病毒。本病毒对热、甲醛、***、紫外线都很敏感。对石炭酸有一定的抵抗力。病毒在pH5～9中，一般较稳定。本病毒能耐受3%酚，但不耐受5%的酚。5%石灰乳和0.5%苏打，0.5%硫酸和盐酸3min，0.5%～1%NaOH均能将其杀死，在胃蛋白酶、胰蛋白酶于pH7.6时90min可破坏本病毒。

　　流行病学

　　易感性

    自然条件下猪、牛（黄牛、水牛）羊、犬、猫、兔、鼠等多种动物，都可自然感染本病。野生动物如水貂、貉、北极熊、银狐、蓝狐等也可感染发病，除马属动物和高等灵长类（包括人）外，许多哺乳动物和禽类都能实验感染。马属动物对本病有较强的抵抗力。人偶尔也可感染发病。PRV对大多数动物呈致死性感染，实验动物中家兔、豚鼠、小鼠都易感。其中以家兔最敏感。在已知的自然宿主中，猪最具耐受性。猪和鼠类是自然界中病毒的主要贮存宿主和排毒者，是引起其他动物发病的疫源动物，在PRV的传播上起着甚为重要的作用。

　　传染源

    病猪，带毒猪及带毒鼠类是本病重要的传染源。病毒主要从病猪的鼻分泌物、唾液、乳汁和尿中排出，猪感染后2～4周内径口、鼻排毒，康复6个月后的猪三叉神经节和扁桃体内可分离到病毒，有的带毒猪可持续排毒1年，其他动物的感染与接触猪、鼠类有关。健康猪与病猪，带毒猪直接接触可感染本病。猪、猫、犬常因吃病鼠、病猪内脏经消化道感染。

　　传播途径

     除猪可经直接接触或间接接触发生传染外，其他家畜主要由于吃食病尸及病畜污染的饲料后经消化道感染。此外，本病还可经呼吸道黏膜破损处和配种等发生感染。妊娠母猪感染本病时可经胎盘垂直传播侵害胎儿，PRV可通过胎盘而传递给子体，而母体免疫球蛋白却不能保护，所以对胎儿的感染是致命的。泌乳母猪感染本病后1周左右乳中有病毒出现，可持续3～5d，此时仔猪可因哺乳而感染本病。带有病毒的空气飞沫核可随风传到9km或更远的地方，使健康猪群受到感染。近来研究表明还能通过生殖道感染，被污染的饲料、或带病毒的鼠、羊等动物也可传播。牛常因接触病毒而感染发病，但牛和猪之间也可以互相传播。

　　流行经过

    猪伪狂犬病的发生、病的演变过程、临床病理与猪的生理状况、年龄、品种、猪舍结构、饲养方式、猪群密度、温湿度、病毒的毒力、防疫措施的严格程度及免疫接种与否等而表现出很大的差异。

　　据杨宜生报道：一般首次发生伪狂犬病的猪群，发病第一周最初1～2天。在母猪群及育肥猪群中发现少数猪精神委顿，食欲不振，体温升高0.5℃左右，便秘增多，间或有轻度咳嗽、喷嚏、腹式呼吸而误诊为支气管肺炎。随着时问的延长，病猪渐多，并以罹病猪群为中心，向毗邻猪栏或猪舍蔓延。饲养密度高的育肥猪栏和仔猪培育舍中，往往全群几乎同时感染发病，猪舍一反常态，变得异常安静，除患猪抑郁、食量大减或废绝外，呼吸器官病症尤其明显，幼弱病猪开始死亡。发病第二周随着环境中PRV污染程度的加重，病势迅速扩展，全场各栋猪舍都出现大量病猪，多数呈现呼吸道病综合征，死猪急增，部分架子猪出现中枢神经病损综合征，神经症状明显，至此，才开始怀疑是伪狂犬病。生产母猪群表现拒食、发热、便秘、咳嗽、呼吸急促困难、腹式呼吸、呕吐等，有些呈现濒死状态，1～2天后死亡(2%～5%)或开始好转，妊娠母猪出现流产。育肥猪群病势更猛，饲养密度高的仔猪哺育舍病死率高，断奶至育成期的病死率高达30%～50%。有些死猪鼻孔流出带血的分泌物。并发病毒性肺炎者，肥猪的致死率也高达5%～10%。3月龄以内的中猪许多出现神经症状，表现后躯摇晃、尾根及头部震颤、共济失调、角弓反张、癫痫、转圈、尖叫、跳跃等。瘙痒发生率仅为1%～2%。带仔哺乳母猪感染后在泌乳逐渐停止的同时，仔猪吸吮含有PRV的母乳受到感染，2周龄内仔猪病死率100%，3～4周龄病死率50%左右。仔猪感染后36h出现呕吐、抑郁、下痢、发抖、脱水、衰弱、卧地不起、死亡，有的还出现流涎、转圈、下意识动作、癫痫强兴奋性痉挛、惊跳等。这时，场长和技术员已一筹莫展，无计可施。

　　发病第三周，疫情达到顶峰，早期感染猪徐徐康复，精神食欲逐渐正常，但妊娠母猪流产病例增多，死胎、流产发生率达20%～60%，干尸化胎儿发生率达20%～30%。怀孕早期的母猪多在病后1周内流产，而中、后期的妊娠母猪多在病的恢复期流产。在分娩母猪群，大多数哺乳仔猪已经死亡，残存的仔猪亦多半虚弱。这种繁殖障碍和异常产仔状况可持续1个月以上。早期感染的肥猪群也逐渐康复，猪群越大，恢复越慢。

　　发病第四周，猪场病势逐渐缓和，母猪康复，死胎、流产呈散发性发生。但猪群呼吸道病损综合征较多并逐渐转为慢性。因后遗症和继发感染，猪群的淘汰剔除率上升。怀孕母猪的异常产仔仍在继续发生，但新生仔猪的发病和死亡大幅度减少，这是因母猪感染后免疫，初乳母源抗体的保护所致。发病后2～3个月疫病发生停息，然而，康复猪群对各种应激因子的影响十分敏感，有可能再度发病．但发生规模要小。大多数母猪可产生坚强的免疫力而繁殖正常，虽哺乳仔猪生长发育正常，但由于大量母猪流产及异常产仔，猪场的整个生产计划陷于混乱。发病后半年育肥猪群的呼吸系统器官感染增多。母猪繁殖成绩良好。哺乳仔猪生长发育正常，但到8～12周龄后，当母猪抗体消失时，容易遭受潜伏带毒猪排出的PRV感，猪群中急性病毒性肺炎病例死亡增加，机体的免疫功能下降，猪群的嗜血杆菌病、支原体肺炎、萎缩性鼻炎的发生率大幅度上升，而使猪场继续蒙受损害。肺型（呼吸型）伪狂犬病：潜伏期1天或更长，患猪食欲突然消失，体温41～42℃，稽留，剧烈咳嗽，鼻孔流出黏稠脓性分泌物，急速腹式呼吸，犬坐势，猪处于半昏迷状态，部分病例有神经症状，一般数小时至2天内死亡，病死率10%左右，耐过猪7～8天康复。无疹痒症状。

　　犬、猫的伪狂犬病：在猪群发病的同时，犬、猫等伴侣动物往往发病。多数病例体温正常，动物行为异常，沉郁，个别行为狂暴，攻击人畜。头、肩、颈部皮肤奇痒，不断抓、搔和啃咬出现痒感部位的皮肤，用头部摩擦墙壁等，使皮肤受损糜烂，随着病情发展，病犬猫疯狂地抓咬皮肤。犬大量流涎，呼吸困难，1～3天死亡，病死率100%，内脏无灰白点等病变。

　　流行特点 本病一年四季都可发生，但以冬春两季和产仔旺季多发。往往是分娩高峰的母猪舍首先发病，该猪舍几乎每天都有产仔，几乎每窝都发病，窝发病率可达100%，但发病和死亡往往有一高峰（于分娩高峰滞后约5d），以后逐渐减少，由整窝发病变为每窝只发病2～3头，死亡率下降，其他母猪舍主要表现为散发，一窝发3～4头，死亡率也较发病率低。发病猪主要在15日龄以内仔猪，发病最早是2日龄，发病率为98%，死亡率85%，随着年龄的增长，死亡率可逐渐下降，成年猪多轻微发病，但极少死亡，主要发病的母猪舍病程约15d左右，其他母猪舍流行时间稍长为1～2个月，而肥猪舍约为一周即可停息。该病多呈地方性流行，也有散发。在疫区，怀孕母猪出现流产、死胎或木乃伊胎；成年猪多呈一过性而耐过，但体内长期带毒和排毒成为本病的主要传染源；仔猪出现神经症状、麻痹、衰竭死亡，甚至伴有消化系统症状，死亡率几乎100%。本病的传播途径主要是呼吸道和消化道，也可通过皮肤外伤、乳汁、交配，精液或胎盘感染。

　　国内流行情况 自刘永纯( 1948)首先在我国发现猫Pr以来，相继有许多省（市）报道有Pr的暴发和流行。猪、牛、绵羊、犬、猫、山羊和貂均有发病，但以猪为主。该病在我国流行范围很广，到目前为止，已扩展到21个省（市）。最近几年湖北、湖南、广东、北京、内蒙古及东北三省许多猪场均有该病暴发。

    刘显煌等报道自解放以来至80年代初，广东极少发生猪伪狂犬病，首次和第2次报道该病的时间是1958年，自此之后30年来未发生过猪伪狂犬病。大规模暴发开始于集约化大型猪场相继崛起的80年代末，10多年来，该病一直呈不断扩展蔓延之势，目前该病已成为常见病。

    任裕其等报道仅广东省在1988～1995年有26个猪场流行Pr，发病场的经产种猪共19750头，全省100多个大中型猪场的30%，经统计，流行的猪场是1988年前40年总和的8.7倍。黄骏明等根据送检病料对黑龙江、吉林、辽宁和内蒙古等四个省34个猪场进行流行病，学调查其结果阳性场占58.82%( 20134)。

    刘兴民等报道，1995年3～4月内蒙古奈曼旗某猪场532头仔猪，相继发病死亡186头，占总仔猪数的34.96%。

    闫长茂报道大连某猪场在1993年1～5月，全场有871头母猪产仔7370头，因病死亡1882头，其中因Pr死亡的猪940头，占死亡总数的49.9%，新生仔猪发病率、死亡率100%。

    李树寿报道北京某场1994年2～3月因该病死亡300余头，死六率95%以上。

    童光志报道3个商品场发生Pr，其中窝发率100%、发病率为98%，死亡率为85%。

    黄志鑫等报道，某猪场于1991年10～11月，产仔59窝，共产仔585头，其中产死胎干尸149头，死胎干尸占产仔数的25.5%；全部活产的仅为16窝，占27.1%，全部死产的为4窝，占6.8%。

    陈焕春等报道，武汉市某种猪场在1990年秋季有35头母猪共产仔305头，其中死胎290头。

    黄骏明等报道，某场在1995年3～4月份陆续有97头母猪发生繁殖障碍，发病率高达37.74%，有52头母猪全窝死胎，45头母猪，部分死胎或少数木乃伊，其中初产母猪76头，占全场初产猪的37.25%( 76/204)，经产母猪21头，占全场经产猪的39.6%( 21/53)不论初产还是经产母猪均可发生Pr，发病不分季节性，一年四季均可发病。引起新生仔猪大量死亡，特别是一周龄内仔猪发病率及死亡率几乎100%，有的全窝死亡。

    傅胜才报道，1991年某种猪场20窝仔猪有12窝发病，122头发病仔猪中有44头死少，其中有3窝全部死亡。

    韦华姜报道，湘北某种猪场25窝猪有12窝发病，窝发率为48%，发病窝仔猪发病率为64%( 80/124)，死亡率为100%。

    黄骏明等还报道了黑龙江、吉林、辽宁及内蒙古四省（区）的20个发病场中，有15个场是在3～5日龄仔猪因暴发PRV全窝死亡，占发病场的75%。

    宋念华，李复中等（2000年）报告了全省性猪伪狂犬病血清学检查，全省共查13个市、州50个县（市）的86个场，其中已用过疫苗的55个场，从未用过疫苗的31个场，查出阳性场53个，其中未用过疫苗的阳性场24个，占未用疫苗场的77.4个抽查种猪8424头，阳性猪889头，平均阳性率为10.4%，其中检查母猪5881头，阳性533头，阳性率为9.1；检查公猪475头，阳性26头，阳性率为5.5%。母猪的阳性率比公猪的阳性率高3.6个百分点；查后备母猪1583头，阳性119头，阳性率为7.5%。查后备公猪201头，阳性22头，阳性率为11%。为所有检测猪中阳性率最高。在检查的8424头生猪中，已注射过疫苗的有2345头，阳性有563头，阳性率为24%；未注射过疫苗的猪6079头阳性猪326头，阳性率为5.4%，低于阳性率平均水平。抽查了后肢麻痹等临床可疑症状社会农户散养的猪284头，查出阳性猪高达66.5%阳性猪占总阴性数的21.3%，这初步说明这些可疑猪感染有伪狂犬病病毒。杨宗照( 2004)应用血清学调查杭州地区14个规模化猪场176份血清的PR野毒抗体为23.9%，其中种猪36.5%，育肥猪32.7%，仔猪20.8%。近年来，猪伪狂犬病在我国部分地区的有扩大的趋势，应引起重视。

　　周绪斌，李聪，栗娟，秦云( 2007)报道，对我国9个省市，75个规模化猪场共4703份血清(2006年)，血清学检测结果75个规模化猪场中有52%的猪场伪狂犬病野毒抗体阳性，所有血清样品野毒阳性率为16.9%。天津、河南、浙江、河北、广东等省市有超过50%的猪场为阳性，河南、河北和天津样品血清阳性率较高(>25%)，而浙江和广东，虽然阳性场比例较高，但是样品阳性率低于10%，而在江西，阳性场为21.4%，样品阳性率为3.2%。